蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验
Laemmli凝胶电泳法
无尿素条件下用Tris缓冲液分离多肽
连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
超薄凝胶的灌制和电泳
均一浓度的微型凝胶电泳
制备多块梯度胶
| 实验材料 | 蛋白质 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | Tris·Cl SDS |
| 仪器、耗材 | 电泳仪 离心机 真空泵 |
| 实验步骤 |
1. 按厂商的使用指南用两块干净的玻璃平板和0.75 mm 垫片组装电泳装置中的玻璃平板夹层，并固定在灌胶支架上
9. 小心拔出了Teflon梳子，避免撕裂聚丙烯酰胺凝胶加样孔。取出梳子后，以1×SDS电泳电极缓冲液冲洗加样孔，并以此缓冲液充满之。
11. 将固定于上槽的凝胶板放入下槽中，并往上槽加入部分电极缓冲液至刚好淹没凝胶的加样孔。
12. 用带平嘴针头的25 μl 或100 μl 注射器将同样浓度的蛋白质样品等体积加入到样品孔中，小心加样使样品在孔的底部成一薄层，对照孔加入蛋白质分子量标准样品，如有空置的加样孔，须加等体枳的空白1×DS样品缓冲液，以防相邻泳逭样品的扩散。
13. 再往上槽加入余下的1×SDS电极缓冲液，以能将上槽的铂金电极完全淹没为准。此操作须缓慢小心，以防冲起样品孔中的样品。
15. 关闭电源并撤去连接的导线，弃去电极缓冲液。连同上槽一起将凝胶夹层取出。
17. 小心将封边的垫片抽出一半，并以此为杠杆撬起上面的玻璃平板，使凝胶暴露出来。
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