食品安全检测Elisa试剂盒的选择标准（一）
Elisa生物检测是一种敏感度高，同时特异性强，重复性好的实验检测方法，由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
目前市面上的Elisa试剂盒检测原理主要有以下四种：直接法，间接法，夹心法，竞争法。
四种Elisa检测方法由于其检测原理各有优劣：
| 优点 | 缺点 | |
| 直接法 | 1.操作简便 2.消除了二抗交叉反应 |
1.一抗由于添加标签免疫活性降低 2.标记一抗耗时且昂贵 3.没有产生信号放大 |
| 间接法 | 1. 一抗的最大免疫反应性得以保留 2. 高灵敏度，信号放大 |
1. 二级抗体可能发生交叉反应，产生非特异性信号 2. 需要额外的孵育步骤 |
| 夹心法 | 1.特异性，灵敏度高 2.适合复杂的样本 |
1.检测时间，反应时间增加 2.步骤繁琐 |
| 竞争法 | 1. 通过观察预期信号输出中的干扰来测量样本中抗原（或抗体）的浓度。 2. 最常用于分析物较小，不能同时跟两种不同的抗体结合。 |
1.计算不太直观 2.总体敏感性和特异性较低。 |
通常我们在购买我们所需要的Elisa试剂盒时主要会从以下几个方面进行选择：
Elisa试剂盒选择原则：
| 指标 | 选项 |
| 样本类型 | 人，小鼠，大鼠 |
| 检测指标的类别 | •多表位的大蛋白：夹心ELISA •小分子：竞争ELISA |
| 检测需求 | 定性或定量 |
| 灵敏度 | 低浓度的物质需选择高灵敏度检测方式 |
| 样本体积 | 珍贵的样本用少量的体积 |
| 回收率和线性 | •灵敏度 •动态范围 •标准曲线 |
| 检测系统 | 比色法，荧光法，发光法 |
| 其他优势 | 协议简单，操作方便，实验时间短 |
我们购买的Elisa试剂盒质量到底怎样？检测结果的可信度高不高？
Elisa试剂盒评价标准：
① 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。
② 灵敏度：反应试剂盒的最低检测浓度
③ 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
④ 重复性：板内、板间变异系数
⑤ 回收率：判断实验的准确性和特异性
Elisa试剂盒的标准曲线：
标曲R值是几个9才合格？
实验室应按检测标准（方法）的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准（方法）如无具体的要求，至少使用5个标样（除空白外）建立线性标准曲线，每个点重复测定1-3次，对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不应低于0.98，对于确证方法，相关系数不应低于0.99。
其实，大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准，实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半（中间浓度）的位置才比较准确，如果线性大于0.999的话，在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。
如果检测的线性不好，可以减少标准的覆盖范围，将标准的浓度调整到待测样品浓度附近，这样结果也是非常准确的。例如，样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线，但线性非常不理想，这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间，作五个标准。
