荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术（一）
Power Styramide™信号放大（PSA™）是一种新颖的酶检测信号放大方法，用于检测细胞和组织中的低丰度靶标。通过将iFluor™染料的卓越亮度和光稳定性与多HRP介导的PSA™成像相结合，可产生明亮的荧光信号，其准确性和灵敏度明显高于传统的免疫组织化学，免疫细胞化学和原位杂交技术。
Power Styramide™信号放大（PSA）
与酪酰胺信号放大（TSA）相似，PSA利用辣根过氧化物酶（HRP）的催化活性原位共价沉积荧光团。 PSA自由基具有比酪胺自由基高得多的反应性，使得PSA系统比传统的TSA试剂更快，更稳健和灵敏。与酪胺试剂相比，Styramide 缀合物具有以更高效率标记靶标的能力，因此产生显着更高的荧光信号。PSA™成像技术可以轻松应用于任何检测过程中需要加入HRP的应用中，例如IHC，ICC，IF， 原位杂交和ELISA。
图1.PSA™检测方法检测原理示意图。使用常规的检测方法，用未标记的一抗和HRP-二抗缀和物检测细胞或组织样品。HRP催化标记的Styramide™转化为高活性的Styramide™自由基，这些自由基与酶位点上或附近的酪氨酸残基共价结合。
PSA™成像系统的优势：
每个HRP标签的多个Styramide™底物的快速催化和共价沉积所产生的Power Styramide™信号放大转化成了许多实际优势，包括简单，灵敏度和特异性增强以及与其他技术的兼容性。Styramide™基团的较高反应活性，使其在HRP-靶标相互作用位点更牢固，更快速地标记，从而比TSA产生更强的信号和更好的空间分辨率。
PSA™特点及优势：
超灵敏的低丰度靶标检测，比IHC，ICC和IF方法高100倍
高荧光强度，比酪酰胺（TSA）高10至50倍
与其他荧光标记，染色技术和PSA™成像试剂盒兼容，可进行多重分析
与放射线检测相比，PSA™自由基具有更高的反应活性，可提供更快的结果以及同等的灵敏度和分辨率
保留珍贵的抗体，PSA™标记可减少一抗使用量，也能达到同等水平的灵敏度
PSA™成像试剂盒易于使用，并提供足够的试剂用于100次测试
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| iFluor™594 Styramide™ （货号45035） | AlexaFluor®594 tyramide（货号11082） |
优越的检测灵敏度
将PSA™成像应用于免疫染色实验中，可以增加一抗稀释度，而不会使测定灵敏度降低。此外，增加一抗稀释度会降低非特异性背景信号，并克服固定方法不当或目标表达水平低引起的免疫标记不足。
图3. Power Styramide™信号放大（PSA™）套件的灵敏度。固定，渗透并用不同浓度的兔抗微管蛋白一抗标记HeLa细胞。厂商建议的稀释度为1：500或2ug / ml。然后，在我们的iFluor™488 PSA™成像试剂盒中用山羊抗兔IgG，AlexaFluor®488标记的酪酰胺或AlexaFluor®488标记的山羊抗兔IgG的试剂对细胞进行染色。在相同条件下（使用FITC滤光片组并在相同的曝光时间下进行分析）从每种处理中捕获细胞图像。测量了相对荧光信号强度，并比较了不同检测方法之间的荧光强度。
