荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术（三）
灵活的工作流程：与IHC，ICC，ISH和流式细胞仪兼容：
PSA™成像技术可适用于能在其检测方案中添加HRP的任何应用，并且与免疫学应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。与传统的IHC，ICC，ISH和FC应用程序结合使用时，PSA™成像可显著提高检测灵敏度，而不会降低图像分辨率或增加背景信号。
1. 免疫细胞化学（ICC）
HL-60细胞的CD45表面受体染色。Hl-60细胞用4％甲醛固定，通透并用0.2 µg / mL抗CD45一抗标记。然后将细胞用iFluor™647 Styramide™染色，并使用Cy5滤光片拍摄的荧光图像。
2. 原位杂交（ISH）
使用生物素化的PNA探针通过原位杂交对着丝粒进行染色。使用标准方案将Jurkat细胞固定并透化，用链霉亲和素HRP缀合物检测每个染色体的着丝粒，并用iFluor 488苯乙烯酰胺试剂可视化，用DAPI染色细胞核。
3. 流式细胞仪
使用iF488标记的山羊抗兔IgG方法，酪酰胺方法或苯乙烯酰胺方法对Jurkat细胞中的pAKT进行流式细胞分析。苯乙烯酰胺扩增方法的信号强度比山羊抗兔IgG-iFluor™488直接染色高10倍，比Alexa Fluor 488酪酰胺染料染色高5倍。
PSA™成像工作流程：
PSA™成像利用辣根过氧化物酶（HRP）的催化活性在原位生成目标蛋白或核酸序列的高密度标记。与IHC，ICC和ISH程序的常规工作流程相似，PSA™成像易于执行，包括几个简单的过程。在此工作流程中，将荧光二抗替换为多HRP标记二抗，唯一的附加步骤是与标记的Styramide™一起孵育。
1.固定，透化和封闭细胞或组织样品。用未标记的一抗，生物素化一抗或生物素化核酸探针孵育样品。
2.加入HRP标记二抗或HRP-链霉亲和素偶联物。
3.添加iFluor™染料Styramide™工作溶液，进行HRP催化的Styramide™沉积。
4.装入样品并检测信号。
图5. Power Styramide™信号放大（PSA™）的工作流程。通过类似于常规ICC和IHC方法的工作流程，PSA™试剂盒和Styramide™试剂可以通过几个简单的步骤就可以对所需目标物进行灵敏检测。
