血培养标本采集及常规处理流程
血培养是把静脉穿刺获得的接种到一个或多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别或其它可培养分离的（如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。
根据美国CLSI标准，采血次数、采血量、采血时间以及培养瓶被称为是确保血培养最佳检出率的4把“密匙”。正确的采血次数、充足的采血量、适当的采血时间和含树脂的培养瓶对于血培养检测结果都至关重要。
（一）采血指征
对入院的危重病人未进行系统性抗生素治疗时，应及时进行血液培养，病人出现以下临床表现时可作为采集血培养的重要指征。
1.发热(>38℃）或低温（<36℃）、寒战；
2 .白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）或粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L）或血小板减少;
3.皮肤、粘膜出血;
4.昏迷、多器官衰竭;
5.血压降低、呼吸加快;或同时具备上述几种临床表现时应采集血培养。
在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应该增加尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症患儿（特别是2岁或2岁以下的幼儿）一般在门诊就诊，常伴有明显发热（>38.5℃）和白细胞增多（>20×10^9/L）。老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎的重要指征。
（二）采血时机
1．尽可能在抗菌药物使用前采集；对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；
3．在寒战和发热初起（体温刚刚开始升高）时采血可提高培养阳性率，一旦体温达到高峰，往往大部分细菌在血中已被清除了，培养阳性率自然就不高了。
3．怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过39℃才抽血，而错过时机。
（三）消毒及血液采集程序
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题。由污染菌引起的假阳性增加了病人抗生素的使用量。在理想的消毒条件下，仍有3%~5%血培养中混有污染菌，它们来源于皮肤（表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、梭杆菌属、类白喉群）或环境（革兰阳性芽孢杆菌属、不动杆菌属），一次血培长革兰阳性芽孢杆菌属、棒状杆菌属、痤疮丙酸杆菌或凝固酶阴性葡萄球菌的标本一般视为污染。所以血培养标本采集的无菌操作至关重要。
1．手卫生：洗手或手消毒。
2．准备血培养瓶：一般同时取需氧、厌氧两者血瓶，检查血培养瓶有无破损、保质期。
3．皮肤消毒：严格仔细消毒处理，最大限度地降低皮肤污染。
采用3步消毒法即酒精-碘酒-酒精模式，以穿刺点为中心向外螺旋式消毒穿刺部位皮肤3遍，保证穿刺点及周围皮肤无菌状态，防止皮肤寄生菌或环境引起的污染（消毒范围为5cm，每遍作用30秒，待干）。
4．消毒血瓶：用75%酒精消毒血培养瓶塞，酒精作用60秒，待干。
5.采血：持穿刺针按常规方法刺入静脉，另一头刺入相应血培养瓶内，利用瓶内真空抽取血标本，如用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶。
如果不能满足推荐的采血量时，应首先满足需氧瓶；婴幼儿血培养一般只抽一瓶需氧瓶进行培养，无需常规做厌氧瓶。
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6．血液注入血培养瓶后轻摇瓶子以防血液凝固。
（四）采血量和血培养的数量 1.采血量：对从菌血症或真菌菌血症病人血培养中获得的微生物，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。对婴幼儿和儿童，一般每瓶采血2ml～5ml用于血培养。成人血培养的标本量为每瓶10ml，血液和肉汤比一般推荐为1:5~10。在此基础上，每增加1毫升血液，则阳性率大约有1.3%的增加。 2.血培养的数量：美国CLSI规定： 一套完整的血培养应该包括（需氧+厌氧）×2个部位 血液培养应包括需氧菌和厌氧菌培养,应间隔1小时作2~3次血培养,每次应从不同部位静脉取血,这样可使阳性率从65%提高到95%。 2.1怀疑血流感染(BSI)时，正确的操作应该是几乎同时在不同部位采血培养2套，各自做好标记。这样血液培养的阳性率可以高达80%左右。而送检1次5~10毫升血培养的做法，其病原菌阳性检出率仅为7%~10%。 2.2当怀疑骨髓炎、脑膜炎、肺炎和肾盂肾炎合并菌血症时，在抗菌药物使用前从不同部位抽取2套血培养，两个来源的采血时间必须接近（建议≤5分钟），各自做好标记。 2.3对不明原因的发热、某些感染性疾病如心内膜炎患者血液中的病原菌间歇出现，很难捕获。由三个不同的部位抽取3套血培养或更多的血液标本，每套间隔时间≥1小时，当培养24～48h后若为阴性，则继续采集2套血培养，提高阳性检出率。 2.4导管相关血流感染（CR-BSI）： (1)希望保留深静脉导管者：至少2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，另一套从导管采集，两个来源的采血时间必须接近（建议≤5分钟），并各自做好标记。 (2)决定拔除深静脉导管者：从独立的2个外周静脉部位，无菌采集2套血培养，同时无菌下取出导管并剪下5cm导管末梢送（实验室采用Maki 半定量平板滚动培养）。
（五）标本运送 1．已采集的标本应视为潜在性生物危险品，均应置于防漏、防渗、相对密封的容器中收集、存储与转运。 2．血培养采样结束后应由专人立即送至微生物实验室核收，一般不得超过2小时；如因某种原因不能及时送检，应将已采集好的血液培养瓶放在室温，切勿放入冰箱内冷藏或冷冻。 3. 填写申请单时，一定要标明病人相关信息、每瓶标本采血时间、来源和抗菌药物使用情况。 血培养瓶可以从所有感染部位,包括感染的体腔、关节间隙、软组织和病损的皮肤获取脓液或作培养。 |
