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制备薄层色谱技术综述

2020.3.24

制备薄层色谱使用薄层色谱板进行制备分离,从混合物中提取所需要的单体。与常用的柱色谱相比,具有简单、快速与节省溶剂与人力的优点,是实验室比较常用的制备方法之一,比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三个类别。

1、 制备薄层板色谱

制备板:一般使用200X200mm的薄层色谱板,吸附剂厚度最好为0.5~1mm,一般不超过2m,平均1mm厚需要的硅胶量为 15~20g。为了得到低成本、铺层均匀的高质量制备薄层板,建议使用上海科哲公司的TD-II型全自动制备薄层铺板机。

点样:制备薄层分离的样品量大,一般采用条带点样、不使用圆点点样;一般1mm厚的硅胶最大约100 mg,样品浓度不宜太稀,应在2~10%为宜。为了得到均匀而规则的点样结果,建议使用上海科哲公司的SP-3型电动薄层条带点样器。同时展开剂的用量比较大,点样位置要比较高

展开:薄层色谱层析缸要充分饱和,如制备板数量较多,请选用上海科哲公司的制备薄层板架;

显色:一般使用紫外灯或碘蒸汽等非破坏方式显色,或在板边缘进行化学试剂显色;

回收:将检测到的样品连同硅胶一齐刮下,防入砂芯漏斗,使用适当溶剂将组分洗脱,将洗脱溶剂蒸干即可。一般希望洗脱溶剂沸点较低,不与组分发生反应。

制备薄层板色谱优点是使用最为方便、便宜、节省人力,缺点是分离时间较长。

2、 制备离心薄层色谱

与普通制备板有三个不同点:

首先:色谱板是圆的,是径向色谱,分离能力优于方板;

其次:洗脱液的流动不靠毛细现象,靠离心力,减少了分离时间与脱尾,分离效能很高;

最后:洗脱液是连续流动的,可以非常容易的形成梯度,并且不需要刮下吸附层,这样可以使色谱板可以反复使用;

所以,制备离心薄层色谱的分离效能与分离速度要远高于制备薄层板色谱,建议采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制备离心薄层色谱仪。

3、制备干柱薄层色谱

可以看作棒状的薄层色谱,优点是简单易行,快速经济、制备量大。缺点是必须使用可透紫外的管材,而且在收集样品时要割断管材,使费用略高。上海科哲公司提供专用的薄层色谱柱。本方法与真空系统联用,构成减压真空色谱,性能会得到进一步提升。

 这三种不同的方法在不同场合都拥有自己的优势,总的来讲,制备薄层板色谱适用于制备量较小、分离程度较好的场合;制备离心薄层色谱适用于制备量中等,分离程度较差的场合;制备干柱薄层色谱用于大量样品制备的场合。三种设备如果互相联用,分离效率会进一步提高。这三种设备也可与柱色谱联用


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