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全自动血型分析仪应用于血站献血者血型检测

2018.8.12

  输血前相容性检测对于保证输血安全至关重要,血站对献血者的血型检测内容包括ABO和Rh血型,血型鉴定手工法为传统、经典方法,但操作费时,且在实验结果判断及报告过程中影响因素较多,而血站血型检测标本量大而更易出现血型错判或漏判等差错。随着输血技术的发展,对血站实验室大批量标本血型检测提出了快速、准确和标准化、规范化、自动化的要求。全自动微孔板血型分析仪的问世,实现了全自动化操作,使输血检验操作进入了标准化和网络化的时代,确保了临床输血安全,也更加有保障。笔者对本站采用Xantus全自动加样器Ak03B数字血型仪和梯形微板整合的一套自动血型检测系统进行ABO正反定型和Rh(D)血型筛查的应用情况进行总结,现报告如下。
  1 资料与方法 
  1.1 一般资料 2011年1月至12月本中心血站采集的无偿献血者全血标本30695例(5 ml/例,EDTA-K2抗凝),样本采集后24 h内检测。
  1.2 试剂与仪器
  单克隆抗-A、抗-B(南京欣迪 20100802 上海华泰 201002071
  201004071 201006071 201101001 20113002),ABO试剂红细胞(上海血液生物 20105327 20105329 20115303 20115309 20115329 20115310 20115313 20115317 20115320),Rh(D)(IgM)试剂(德国BTOTEST 10011170,上海血液生物 20110418)。
  Xantus全自动加样器(瑞士)AK03B型数字血型仪(深圳爱康公司),96孔梯形微孔反应板和96孔红细胞稀释用板(深圳爱康公司配送),HaemoTyper全自动血型分型系统,CAABB血站管理系统。
  1.3 方法 
  1.3.1 单克隆抗-A、抗-B及抗-D血清用生理盐水作1∶12稀释,用生理盐水将ABO试剂红细胞1:2稀释,将标本用Xantus全自动加样仪进行扫描、读取。
  1.3.2 自动加样 为避免样本红细胞污染血浆,先作反定型,后作正定型和Rh(D)血型,进入HaemoTyper全自动血型分型系统,设定好的反定型、正定型和Rh(D)定型程序,将所需标本、试剂加到专用微孔板上。
  1.3.3 待机器加好样本和试剂后,仪器自动将微板移至震荡悬浮器混匀约20 s,使试剂和样本充分混匀,室温静置约1 h后,用数字血型仪读板,将HaemoTyper全自动血型分型系统结果传输到CAABB血站检验管理系统。
  2 结果 
  应用全自动血型分析仪检测30695例标本,因递形板脏、凝块过大,红细胞稀释浓度不宜,红细胞沉淀点过大或过小,严重脂肪血等原因判读错误而用肉眼或手工试管法修正血型295例,其余为一次性准确判定结果,正确率为99.04%,同时纠正采血前ABO初筛定型错误70例,ABO正反不符28例,检出Rh(D)阴性105例,经本站血型参比实验室鉴定Rh(D)阴性结果完全相符。
  3 讨论 
  利用全自动加样系统进行血型检测,其吸液加样方式和红细胞血液的质量对检测结果有很大影响,在加样程序编辑时应注意加样时的吸样深度,每份标本红细胞的比例有差异,为保证加样针能够充分吸到红细胞,将针头吸样深度参数设置到试管底部上0.5 cm处,在混匀稀释板红细胞悬液时,要防止冲力过大导致孔内液体溅出而污染周边标本。血清效价和红细胞浓度也会直接影响凝集反应,影响结果的判断。因此,用微板法检测血型试剂必须进行优化。
  使用全自动血型仪必须做好试剂准备工作,包括红细胞新鲜配制,无溶血、无霉菌生长、无污染,抗-A、抗-B标准血清及抗-D血清无污染,并且稀释浓度要求适宜(1∶12稀释),否则效价太高,凝集块太大,不能在孔内均匀分布,凝集块沉淀于孔底,影响吸光度,使结果不准确,避免递形板太脏而影响血型结果,递形板每次使用后,应清洗干净,最好用摩尔洗液(1∶ 1000)浸泡过夜,次日用清水冲洗干净,晾干备用。操作过程中,应避免加试剂后形成气泡,影响读板,每次结果出来后需要目测微板与数字血型仪结果看是否一致,避免气泡、脂肪、板底部太脏,有印痕或未干的水渍,加红细胞量多少或试剂不足等引起的血型错误。判读结果时需注意核对,不能单纯依靠仪器判读结果,必须结合肉眼和经验甚至手工鉴定。
  由于全自动血型仪对数字血型拍照结果判断临界质都是根据正常的红细胞血型设置的,在抗原减弱程度不一的情况下,便有可能造成亚型漏检,对血型正反不符的标本通过经典试管法可以弥补。
  应用血型自动分析系统,从标本的条码扫描、标本加样、分配试剂到结果的判读、打印,再到应用血型检验管理系统登记结果,都用仪器完成,实现了血型检测工作的程序化、全自动化、标准化和规范化,结果记录自动打印,原始记录有标本的条码、板号、试剂厂商和批号及失效期,数字血型仪读板结果等重要信息,应用数字血型仪数码成像并进行数字化处理,简便、快速,且可保存原始数据,便于追溯,完全实现了自动可监控化,还可设置试剂过期拒绝判读结果,应用血站检验管理系统自动登记结果,避免了人为因素对试剂结果的影响,提高了工作质量和工作效率,减少了检验人员职业暴露的机会,尤其适用大批量标本处理,全自动血型检测技术相关性好,重复性好的优点,降低了实验工作者强度,节约试剂成本,降低了错误的发生率,更易发现盐水不规则抗体,确保了输血的安全。 

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