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还原糖含量测定——用斐林试剂热滴定法

2019.4.10

实验方法原理	斐林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液含有硫酸铜和次甲基蓝；乙液含有氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。混合时，硫酸铜与氢氧化钠起作用生成蓝色氢氧化铜沉淀，而酒石酸钾钠在碱性溶液中使沉淀的氢氧化铜溶解而成络合物。络合物与还原糖共热时，两价铜被还原为一价氧化亚铜(红色沉淀)，再与试剂中亚铁氰化钾反应生成可溶性化合物而不复析出。斐林试剂中两价铜被还原完毕后才能使次甲基蓝还原为无色，故次甲基蓝在此作为指示剂。
实验材料	葡萄糖
试剂、试剂盒	硫酸铜次甲基蓝酒石酸钾钠氢氧化钠亚铁氰化钾盐酸氢氧化钠
仪器、耗材	滴定管三角瓶电子天平电炉
实验步骤	溶液配制： 1. 斐林试剂甲液：称取15 g硫酸铜，0.05 g次甲基蓝溶于蒸馏水中并定容至1 L。 2. 斐林试剂乙液：50 g酒石酸钾钠，54 g氢氧化钠，4 g亚铁氰化钾溶于蒸馏水中并定容至1L。 3. 6 mol/L盐酸：量取浓盐酸500 ml加蒸馏水至1 L。 4. 6 mol/L氢氧化钠：称取氢氧化钠240 g溶于蒸馏水至1 L。 5. 标准葡萄糖溶液(0.1%)：精确称取葡萄糖（在105 ℃干燥至恒重）1 g溶于蒸馏水中并定容至1 L。操作步骤： 1.空白管测定:取斐林试剂甲、乙液各5 ml，置250 ml三角瓶中，由滴定管加适量0.1%标准葡萄糖溶液，在电炉上加热至沸，然后以4～5 s一滴的速度继续自滴定管中加入标准葡萄糖溶液，滴定至蓝色消失，记下总共所消耗的葡萄糖体积(A)。 2.样品测定:6～7 ml待测样品溶液（含糖量在3～4 mg/6～7 ml），加斐林试剂甲、乙液各5 ml，置250 ml三角烧瓶中，同空白测定一样操作，记下所耗标准葡萄糖体积(B)。 3.计算: 展