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使用中空纤维洗滤,实现自动化换液(二)

2020.5.05

洗滤(缓冲液置换)

洗滤即向样品容器中添加清洗缓冲液,漂洗出可透过膜的小分子物质。在连续型洗滤过程中,缓冲液被连续补充到料液中,其流量与流出中空纤维膜组件的滤液的流量相同。见图4所示。

连续型洗滤如图2所示,在密封系统内进行,缓冲液添加量可自动调节,以保持料液总体积不变。

[注意:也可以使用额外的双泵头来同时调节补充缓冲液和滤液的流量,两者可以相同的流量向样品容器添加缓冲液和抽出滤液(常用于切向流微滤操作)]。

清楚了解洗滤体积VD的概念非常重要。洗滤体积,为容器内料液的体积和循环回路中料液的体积之和。

进行洗滤处理所需缓冲液的总体积常用洗滤次数或体积倍数n来表示:

缓冲液体积=n ×V样品体积  公式3

预估“漂洗掉”某一小分子所需的洗滤体积倍数,可使用图5查找,也可由图表下方所示公式4计算。

如果已知透过系数T以及所用洗滤体积倍数,即可计算得到清除的渗透性分子的百分比。

公式4

总结

洗滤,或浓缩/洗滤,是一种快速、温和、可工艺放大的切向流过滤过程(超滤或微滤),用于漂洗掉可透过膜的小分子或盐离子。小分子可以是低分子量的杂质、缓冲液盐离子、非反应成分或者目的产物(MF TFF,微孔切向流过滤)。通过选择正确的膜孔径并确定浓度与透过率之间的关系,可优化洗滤操作,从而实现稳定、可重复的纯化过程,继而,保证每次操作得到一致的产品。


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