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连锁基因的遗传分析实验

2020.8.24

实验方法原理 连锁遗传规律阐明了位于一对同源染色体上的连锁遗传基因分离和组合的关系。由于连锁遗传基因在分离和组合过程中的相互影响,致使杂合体所产生的各类配子比例不等,其自交和测交子代表现型的分离比例也因重组率的不同而异,但总是重组型少,亲型多。由于基因在杂色体上的位置和距离不同,基因之间的连锁强度也不相同。

基因在染色体上的相对距离可以用重组率表示。决定玉米胚乳性状的某些基因有连锁遗传现象,可以采用两点或三点测验法获得分离果穗,然后通过对籽粒性状的观测分析求得重组率,从而获得基因在染色体上的排列顺序和遗传距离。

已知控制果蝇某些性状的基因位于X染色体上,雄果蝇的Y染色体上不带有同X染色体上相对应的基因。因此,在雄果蝇中表现为完全连锁遗传。通过野生型和突变型果蝇杂交,再使其杂种同隐性纯合亲本测交,根据对测交子代的分析也可以确定基因的位置和距离。

实验材料 玉米果蝇

仪器、耗材 双筒解剖镜放大镜解剖针计算器粗头毛笔白瓷板培养瓶麻醉瓶

实验步骤

一、实验材料和实验用品

1.材料:玉米紫色,饱满籽粒自交系与褐色,凹陷籽粒自交系的杂种一代(F1)果穗以及杂种一代(F1)同褐色,凹陷亲本的测交果穗;野生型和具有白眼(w),小形翅(m),卷刚毛(sn)的突变型果蝇。

2.用品:双筒解剖镜,放大镜,解剖针,计算器,粗头毛笔,白瓷板,培养瓶,麻醉瓶等。

3.药品:乙醚。

二、实验方法和实验步骤

1.玉米胚乳性状连锁基因重组率的测定:当两对基因为连锁遗传时,F2和测交子代的分离比例明显不同于独立遗传,表现为亲型个体数明显多于理论值,而重组型个体数明显少于理论值。可见重组型的产生并不是非同源染色体自由组合的结果,而是同源染色体上连锁基因间发生交换重组而产生的。在玉米中,决定糊粉层色泽紫色与褐色,籽粒形状饱满与凹陷的基因都位于第九染色体上,表现为连锁遗传。使紫色,饱满(BzSh/BzSh)的个体与褐色,凹陷(bzsh/bzsh)个体杂交,F1为紫色,饱满(BzSh/bzsh)。使其与隐性亲本测交,根据测交后代的表现型种类和比例就可以确定这两对基因间的距离。

(1)观察杂合体(BzSh/bzsh)同隐性亲本的测交果穗,区别不同的表现型,计数各类籽粒的数目。

(2)计算bz-sh之间的重组率。

(3)将连锁遗传的分析结果填入表1。

2.果蝇连锁基因的三点测验

(1)使白眼、卷刚毛、小形翅突变型处女蝇与野生型雄蝇交配,每瓶5对。待化蛹后除去亲本成蝇,羽化后鉴定杂种蝇。F1的雌蝇应该为红眼、直刚毛、长翅,而雄蝇表现为白眼、卷刚毛、小形翅。

(2)将F1雌蝇同突变型雄蝇交配,7~8天后移出亲本蝇,以测交子代成虫出现开始,每两天观察一次,将结果填入表2。

(3)分析计算

①根据实验结果确定三对基因的遗传关系。即三对基因是独立遗传还是连锁遗传,或一对独立两对连锁。

②确定各类交换类型和亲型。

③确定三对基因的排列顺序,分析双交换类型,如果有两对性状出现了还原为亲本的组合类型,则决定第三对性状的基因必在中间。

④计算重组率:

⑤绘制连锁图:以1%作为一个距离单位,按照基因的排列顺序,绘出连锁图。


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