干细胞培养器皿的清洗方法
干细胞离体条件下，有害物质可直接与细胞接触，细胞对任何有害甚至有益的物质十分敏感，极少量残留物就会对细胞产生毒性作用。因此，新的或重新使用的器皿都必须认真清洗，使其达到不含任何残留物的要求。因不同培养器皿的材料、结构、使用方法不同，清洗的方法也有区别．现分别介绍如下。
1．玻璃器皿的清洗，玻璃器皿的清洗一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
(1)浸泡：新的或用过的玻璃器皿都需先用清水浸泡，以软化和溶解附着物。新的玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗，然后用5％盐酸浸泡过夜；用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂，干涸后不易刷洗掉，故用后应立即浸入清水中以备刷洗。
(2)刷洗：将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂(不能用含沙粒的洗衣粉)水溶液中，用软毛刷反复刷洗。刷洗中，要不留死角，并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干，备浸酸。
(3)浸酸：浸酸是将上述玻璃器皿浸泡到清洁液，又称洗液或酸液(表2一5)中，通过清洁液的强氧化作用清除器皿表面可能残留的物质。干细胞根据清洁液含硫酸比例，将清洁液分为强酸、次强酸和弱酸三种。根据需要配制和选用不同的清洁液。清洁液对玻璃无腐蚀作用，去污效果很好，是保证器皿洁净的关键一环。一般来说，新的或用过的玻璃器皿都应浸酸，那些无法用毛刷刷洗的用品(如吸管、滴管等)更要靠浸酸去除污物。浸酸时，器皿应完全被清洁液充满和覆盖。浸酸时间不能少于6h，一般要过夜或更长时间。将器皿放人清洁液时．应小心操作．防止伤及皮肤、眼睛或衣服。从清洁液中取出器皿时，应沥干清洁液，并将浸酸的器皿放入合适容器，如塑料盆中运输。
配制清洁液时，操作者必须小心认真，戴耐酸手套和防护眼镜，并严格按下列方法进行：按配方称量好重铬酸钾和蒸馏水，然后将重铬酸钾完全溶于蒸馏水中。按配方把工业用浓硫酸缓慢(以产热很少为宜)加入重铬酸钾溶液中，边加边搅拌。自然冷却、备用。
新配制的清洁液呈棕红色。当使用时间过久，清洁液的颜色变暗、发绿或混浊时，应弃去(深埋地下)．配制新的。配制、盛装清洁液的容器应防酸、耐热、有较大的开口，一般用瓷缸、玻璃制品或耐酸塑料制品。
(4)冲洗：刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗，浸酸后器皿是否冲洗得干净，直接影响到干细胞培养的成败。冲洗可用洗涤装置，也可用手工操作。手工洗涤浸酸后的器皿时．每件器皿都至少要重复“注满水一倒空”15次以上，zui后用重蒸水浸洗2～3次，晾干或烘干后包装备用。
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