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可能原因比较多吧。比如你封闭的不是很好,可以多封闭一会;或者抗体特异性不高,一抗二抗时你可以加一下BSA,或者降低一抗抗体浓度,或者4度过夜;还有就是可能你一抗二抗后用PBST洗得不是很干净。
原国家质检总局 教授