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油类DNA 提取试剂盒(10 次,10ml 每次)使用说明

2020.7.06

油类DNA 提取试剂盒(10 次,10ml 每次)
简述: 本试剂盒能从精练油提取痕量DNA,用于各种检测目的。
适用范围: 各种精炼油
提取时间: 40 分钟至一小时,是目前国內用时最短的试剂盒。
DNA 质量: 树脂法提取,能从大体积或微量体积油中提取高质量DNA,因为精炼油过程中,DNA
破坏严重,因此所提DNA 并不是单一条帯DNA 片段,DNA 片段大小分布在几十bp 至
600bp 之间,1.2%Agarose 电泳后,紫外灯下可能看不到DNA,即使看得见也是一片。
试剂盒组成:
1.溶液A(去油buffer): 110ml 2. 溶液B(裂解buffer): 120ml
3. 溶液C(树脂,resin): 550ul(用前请摇匀)
4. 溶液D(洗液buffer ):110ml 5. 溶液E(TE buffer): 1.5ml
操作方法:
方法一:
1. 取10ml 精炼油加10 ml 溶液A,5ml 溶液B ,摇匀,静置,小心去除上层
2. 加入50ul 溶液C(用前请摇匀),轻摇,静置2 分钟。
3. 8000rpm 离心5 分钟(可常温或4 度),小心弃上清,
4. 加入1ml 溶液B,充分混匀,转移入1.5ml 离心管,8000rpm,离心2 分钟,弃上凊。
5. 加入1 ml 溶液D,充分混匀,转移入1.5ml 离心管,8000rpm,离心2 分钟,弃上凊
6. 重复歩骤5
7. 8000rpm,再离心1 分钟,吸干上清,室温晾干约5-10 分钟。
8. 加入溶液E 50-100ul, 混匀,50-60 度水浴2-5 分钟,
9. 8000-12000 rpm 离心2 分钟,取上清液即为DNA。
方法二:
1 取3ml 精炼油加3 ml 溶液A ,3ml 溶液B ,摇匀,静置,小心去除上层
2 加入30ul 溶液C(用前请摇匀),轻摇,静置2 分钟。
3 8000rpm 离心5 分钟(可常温或4 度),小心弃上清,
4 加入3OOul 溶液B,充分混匀,转移入1.5ml 离心管,8000rpm,离心2 分钟,弃上凊。
5 加入500 ul 溶液D,充分混匀,转移入1.5ml 离心管,8000rpm,离心2 分钟,弃上凊
6 重复歩骤5
7 8000rpm,再离心1 分钟,吸干上清,室温晾干约5-10 分钟。
8 加入溶液E 30-50ul, 混匀,50-60 度水浴2-5 分钟,
9 8000-12000 rpm 离心2 分钟,取上清液即为DNA。
注:可用PCR 检测DNA 质量,方法一或方法二所提DNA 均只需3-8ul/反应即可。

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