免疫病理检查的注意事项及检查过程
注意事项
检查前禁忌：不同的检查方法禁忌不同。
检查时要求：积极配合医生。
检查过程
1. 适应证天疱疮、类天疱疮、红斑狼疮、皮肌炎、皮肤血管炎等免疫性皮肤病。
2. 标本的选择及取材与皮肤组织病理检查基本相同。
3. 标本处理①将需要的皮肤标本用手术或钻孔取下后，立即用OCT复合物包埋剂包埋固 定或将标本用湿润的生理盐水纱布包裹，4℃下保存，24小时内用OCT复合物包埋剂包埋。②OCT复合物包埋剂包埋的标本，经速冻后在-22℃～-25℃条件下将组织切成厚度为4～6μm的薄片，置于玻片上。
4. 直接免疫荧光法：将冷冻切片用0.01mol/L、pH7.4的PBS清洗10分钟，晾干后滴加适当稀释的荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体，在37~C湿盒中孵育30～60分钟，再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次后晾干，用碳酸甘油缓冲液封片，置于荧光显微镜下观察。
5. 间接免疫荧光法：标本来自正常人皮肤或动物组织（如鼠肝印片）；首先将灭活的适当稀释的患者血清滴于标本上，置于37℃湿盒中30～60分钟，再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次，晾干，后续步骤同直接法。
6. 盐裂皮肤免疫荧光法：取患者的皮损或正常人皮肤标本，置于1mol/L的NaCl溶液中，放在4℃冰箱中用磁力搅拌器低速搅动，每24小时换液一次，经过72小时左右，表皮与真皮分离，OCT包埋进行DIF或IIF检查。
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