CellSens standard软件主要功能操作说明（二）

2020.4.27

1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口；

2. 选定“自动处理”选项；

3. 单击“多通道”按钮，按钮将显示为已点击状态，此时该按钮内部的充实浅黄色的背景；

4. 单击添加通道按钮，上下文菜单随即被打开；该上下文菜单中将列出所有当前软件设置的观测模式（DAPI、FITC、CY3、CY5等荧光观测模式）；

5. 选定首先要采集的色彩通道，例如蓝色“FUW”，随后单击第一个色彩通道旁边的小加号，激活当前蓝色通道，并按软件提示将滤色块转盘切换至1号位；

6. 随后将工具窗口切换至“摄像控制”工具窗口，点击“实时观察”对荧光样品进行曝光时间及增益值进行调节，达到一个最佳的观察效果；然后切换至“流程管理”工具窗口，单击读取设置按钮，将最佳观察效果时的曝光时间及增益值读取到当前所激活的荧光通道；

7.后面可以重复操作第4-6步，添加想要与当前已激活通道（例：蓝色通道）组合的其他荧光通道；

8.在流程管理工具窗口中，单击开始按钮，随后软件中的提示依次切换不同的荧光滤色块，每次切换相机都会自动拍一张荧光图像，待指定多通道组合中的滤色块转盘切换完成后，软件自动将不同通道下拍摄的多张荧光图像进行荧光叠加，图像窗口中将显示所有通道的叠加荧光图像；

9.将多通道荧光图像另存为指定文件夹，默认的文件保存格式为“TIF”格式，此为原图保存；

10.如果需要将单个通道下的荧光图像保存，点击“平铺”按钮后，将鼠标放置在需要保存的单个荧光通道图像上，鼠标右键点击“抽取”，软件会将该通道的荧光图像单独抽取出来；此时点击“图像”>“印入信息”>并选择“是”之后再对该荧光图像进行保存，即可得到一张包含伪彩信息的荧光图像，图像格式建议为“TIF”格式。

四、标尺信息显示及保存

如果要在软件中上显示并保存标尺信息，可在进行图像预览时点击“视图”>“标尺”，标尺就会在图像上显示出来；随后点击“拍照”，拍照完成后，再点击“图像”>“印入信息”>并选择“是”之后再对该图像进行保存，标尺信息就会印在该图像上。

五、手动大图拼接（CS-ST+MPC）

1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口；

2. 选定“手动处理”选项；

3.单击“手动图像拼接”按钮，按钮将显示为已点击状态，此时该按钮内部的充实浅黄色的背景；

4.请确定“自动对齐”按钮显示为已点击状态。该按钮应该显示为

5.流程管理工具窗口中，单击开始按钮，软件将切换到实时观察模式，对样品聚焦清楚后，可以移动载物台使得从样品的左上角出现在视野里；

6.接下里单击某个箭头按钮可设置要将下一幅图像排列在当前图像的哪一侧，当你点击箭头时，软件会自动采集当前的样品图像出现出现在图像窗口里，而该采集图像右侧会出现当前的实时图像，通过移动载物台使得实时图像中样品的右上角部分与采集好左上角的图像重合；随后点击箭头时，当前样品左右两部分重合好的图像会被采集，随后在该采集图像下方会出现当前的实时图像，通过移动载物台使得实时图像中样品到右下角部分和采集好的图像重合；依次反复，直至一个完整的样品被完全拼出；

7.将已拼接好的的图像另存为指定文件夹，默认的文件保存格式为 “VSI”格式。

六、手动景深扩展（CS-ST+MPC）

1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口；

2. 选定“手动处理”选项；

3. 单击“即时扩展景深”按钮，按钮将显示为已点击状态，此时该按钮内部的充实浅黄色的背景；

4. 明场图像做景深扩展时选择透射（指数/二次函数），荧光图像做景深扩展时选择反射（指数/二次函数）；

5.在流程管理工具窗口中，单击开始按钮，此时图像窗口下方右侧画面即为当前的样品焦面的实时图像，而图像窗口下方左侧画面显示即为当前焦面上的样品信息，缓慢微调过程中，依次达到样品不同的焦面，等使用微调机构从样品的下焦面走到上焦面后，图像窗口下方左侧画面里会把不同焦面上所有的样品信息完全累积记录；而在图像窗口上方会自动生成一张把不同焦面样品信息叠加后的图片，随后单击停止按钮，图像窗口会生成一张叠加好全部清晰的图片；点击文件> 另存为命令保存新的图像。保存图像时，请始终使用TIF 或VSI 文件格式。