METTL3调控m6A甲基化修饰对小鼠脂肪细胞发育的重要作用-2
（2）BAT中敲除Mettl3对基因表达的影响
为了研究iBAT发育中的分子机制，作者进行了RNA-seq(云序可提供此服务)，分析比较了BKO和正常小鼠的iBAT中基因的表达情况。GO分析表明BKO小鼠iBAT下调基因中富集了与发育、产热等功能相关基因，而上调基因中富集的多与炎症、肌肉发育相关。qPCR(云序可提供此服务)验证到iBAT的标志基因如adiponectin, aP2, Pparg, Glut4和 Cebpα在BKO小鼠中大幅降低，另外还有产热相关基因、线粒体氧化磷酸化相关基因被验证到下调。而被验证到的肌肉发育相关基因的上调，指示了METTL3缺失可能导致BAT向及细胞转化，影响iBAT正常发育。
BKO小鼠和control小鼠BAT中基因的表达
（3）BAT中敲除Mettl3对m6A修饰的影响
作者通过m6A-seq(云序可提供此服务)分析比较了敲除Mettl3对iBAT中mRNA的m6A修饰的影响。分析发现Mettl3敲除导致甲基化位点由集中在3’UTR区变为更加分散，大部分转录本的甲基化程度降低，甲基化位点motif也有所变化。
BKO小鼠和control小鼠BAT中的m6A修饰
联合RNA-seq(云序可提供此服务)，筛选出甲基化程度和表达均下调的iBAT标志基因Pparg,和产热相关基因Prdm16和Ucp1，并通过qPCR和MeRIP-qPCR进行了验证，荧光素酶实验(云序可提供以上服务)进一步验证了METTL3与这3个靶基因的3’UTR区结合，另外也验证了m6A reader蛋白YTHDF2和YTHDF3也与3个靶基因结合。这些实验结果暗示METTL3和YTHDF2/3共同作用调节BAT发育。
METTL3与Pparg，Prdm16和Ucp1结合
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