沙门氏菌的制备
①前增菌 在非抑制性肉汤中进行前增菌，促使沙门氏菌开始生长。所用方法随样品而异，应按 AOAC 967.26A（常规方法）或现行版的细菌学分析手册进行。但下列样品除外。
a.生的或严重污染的样品 以无菌操作称取25g 样品放入灭菌的打碎杯内，加入225mL 灭菌的乳糖肉汤，高速（约20000r/min）打碎2min，盖严杯盖并于室温下静置60min。摇匀，用试纸测定 pH 值，如必要时用灭菌的1mol/LNaOH 或 HCl 调节 pH 值为6.8±0.2。在测定最终 pH 值前，盖严杯盖并混匀。以无菌操作，将每杯中的内容物移入灭菌的带螺旋盖的500mL 广口瓶中。旋松瓶盖1/4圈，于35℃ 培养24h±2h。
b.经加工的食品样品 将前增菌肉汤于35℃培养18～24h。
②选择性增菌 分别转种1mL 经前增菌的培养液于亚硒酸盐肉汤，需将亚硒酸盐肉汤预热至42℃，并于42.0℃±0.5℃水浴中培养6～8h；生的或严重污染食品的选择性增菌必须培养18～24h。
③后增菌 从培养箱中取出选择性肉汤，用手或涡旋混合器混匀。从四硫磺酸盐管中移取1.0mL转种于预热在42.0℃±0.5℃水浴中的 MN 肉汤的管中。从亚硒酸盐胱氨酸肉汤管中移取1.0mL 转种于另一支预热的 N 肉汤管中。除生的或严重污染的样品外，所有食品均应于42.0℃±0.5℃水浴中培养 MN 肉汤14～18h，并于42.0℃±0.5℃（四硫磺酸盐肉汤）或35℃（亚硒酸盐胱氨酸肉汤）将选择性增菌肉汤继续培养14～18h。对于生的或严重污染的样品，以它们各自的培养温度，将选择性增菌肉汤继续培养6h。
④用于 EIA 分析的样品制备——从培养箱中取出 MN 肉汤管，用手或涡旋混合器将其混匀。从每一 MN 肉汤管中移取0.5mL混合于一清洁的带螺旋帽的试管中，在沸水浴或在流动蒸汽中加热20min。于2～8℃ 贮存③剩余的 MN、四硫磺酸盐和亚硒酸盐胱氨酸肉汤管，以便对任何阳性样品培养物进行确证。EIA 分析前，将加热的 MN 肉汤冷却至25～37℃。
