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从3D类器官到单细胞(四)

2020.9.01

材料及给药研究
 

  2019年6月,爱尔兰都柏林大学学院生物与环境科学学院&康威研究所在Small杂志发表名为《A High‐Throughput Automated Confocal Microscopy Platform for Quantitative Phenotyping of Nanoparticle Uptake and Transport in Spheroids》的文章。该研究利用PerkinElmer高内涵Opera Phenix系统,构建了完整的在3D微组织层面研究纳米载体摄取和运输的模型。
 

  作者首先进行3D微组织培养和高内涵拍摄的优化,主要研究了培养条件和固定方法对不同浓度的基质胶的影响,并根据该实验结果确定了培养方法、固定方法和基质胶浓度及用量。


此外,作者也通过顺式到反式高尔基标记物(GM130、GalT和TGN46)的分布染色考察了高内涵的拍摄质量,证明PerkinElmer高内涵系统确实有极高的分辨率,用来研究纳米颗粒的摄取情况是足够的。
 

  接下来,作者通过Harmony软件对层切扫描图片进行重构分析,获取较大亮度投影和3D重构视图,在此基础上定量测量球状体中NP吸收和渗透。
 

  后,作者选择了在纳米颗粒胞吞作用中有功能的蛋白,通过RNAi沉默进行潜在基因筛选,确定该模型可用于评估3D微球NP的摄取和运输过程。
 

  更多详细内容,欢迎您莅临8月4日在中国细胞生物学学会2020年全国学术大会上举办的午餐会,干货报告、午餐礼遇、惊喜礼品等您来参与。
 

                   


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