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从3D类器官到单细胞(二)

2020.9.01

   PerkinElmer高内涵系统的3D方案不仅仅局限于3D微组织,包括模式生物、细胞伪足等立体结构都可以通过高内涵系统完成全面的检测和分析:

 

  珀金埃尔默的单细胞ICP-MS技术,基于业界较快的的细胞脉冲信号读取速度(可达100000点每秒),能定量单个细胞中低至阿克级别的金属和纳米颗粒含量,测定细胞群中金属质量分布和含金属细胞的数量,从而评估与量化细胞群的异质程度。适用于人体、动物、植物等各种组织器官细胞的深入研究。
 

  例如,含金属药物和纳米颗粒越来越广泛的应用于癌症的治疗和检测,单细胞ICP-MS可进行精细跟踪,掌握病变组织在细胞层面上对药物的吸收和代谢,有助于了解癌症机理和提升治疗水平。

 

  两株卵巢癌细胞系A2780( 顺铂敏感型)和A2780/CP70 (顺铂耐药型)随时间变化顺铂摄入量

 

  生物体中的铜含量通过非常有效而复杂的稳态机制得以严格调控,该机制可控制元素的吸收、分布和排出。目前数据得到的细胞铜稳态模型只是一个“骨架” ,用SC-ICP-MS来测量外周血单核细胞(PBMC)中的铜(Cu)含量,对了解稳态机制的失调或失衡可能导致生物体功能异常,并可能与某些疾病(例如炎症、哮喘、衰老过程、癌症等)方面提供了进一步研究的有效手段。

 

   外周血单核细胞(PBMC)中铜的含量

 

  应用领域举例:
 

  3D微组织类器官目前的应用主要集中在肿瘤研究(药筛模型、药筛、肿瘤免疫、个体化医疗)、干细胞和发育生物学、体外模型研究(感染模型、毒性评价)、材料及给药研究等方面:

 

  肿瘤研究
 

  2019年6月17日,Cell Death and Disease杂志在线发表了钱其军研究组的研究成果Modified CAR T cells targeting membrane proximal epitope of mesothelin enhances the antitumor function against large solid tumor。该工作致力于优化肿瘤CAR T免疫疗法。
 

  MSLN(Mesothelin,间皮素)是嵌合抗原受体(CAR)T治疗的诱人抗原,MSLN中的表位选择至关重要。在这项研究中,作者使用修饰的piggyBac转座子构建了两种针对MSLN的I区(meso1 CAR,也称为膜远端区域)或MSLN的III区(meso3 CAR,也称为膜近端区域)的两种类型的CAR系统。其中,meso3 CAR T细胞在激活后表达更高水平的CD107α,并在体外针对表达多种MSLN的癌细胞产生更高水平的白介素2,TNF-α和IFN-γ。

 

  之后,作者构建了胃癌和卵巢癌3D肿瘤细胞模型,并用该模型来测试这两种CAR T系统,通过PerkinElmer Opera Phenix高内涵系统完成3D肿瘤 CART杀伤系统的成像和分析,终证明在3D细胞水平,meso3 CAR T细胞比meso1 CAR T细胞具有更高的杀伤作用。


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