方案1 用 FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素 |
| 仪器、耗材 | 大型离心机配有检测 GFP 滤片的荧光显微镜培养箱微型离心机微量离心管针头多预装层析柱摇床SDS-PAGE 和 2D-IPG SDS-PAGE 仪器超滤柱 |
| 实验步骤 |
一、用于小范围分析的代谢标记
二、细胞裂解
三、用于小范围分析的免疫共沉淀
四、用抗体层析柱大规模富集 FLAG 标记的蛋白质以及与它相互作用的蛋白质
五、用于纯化的蛋白质浓缩
六、纯化和鉴定相互作用蛋白
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