溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话，是可以用的，但是很明显，就要重新设计实验
一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。
扩展资料
一、定义
熔解曲线(Melting curve)是指随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。熔解曲线分析可以用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物。
二、原理
扩增反应完成后，通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生熔解曲线，熔解温度上有一特征峰（Tm，DNA双链解链50%的温度），用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开，因为它们在不同的温度熔解线。随着反应中双链DNA变性，荧光染料又恢复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变与温度作图。在扩增产物的只有染料法才需要做熔解曲线，探针法没有必要，因为熔解曲线是由于染料法的特异性差，所以通过熔解曲线考察扩增产物是否是目标产物，与电泳的其中的一个目的相同，但熔解曲线毕竟是数学推导，并且结果中包含了仪器的误差。
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