如何检测引物的纯度?
实验室方便的做法是用PAGE方法。
使用加有7M尿素的16%的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳。
取0.2-0.5OD的引物,用尿素饱和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到饱和,上样前加热变性(95℃,2mins)。
加入尿素的目的一是变性,二是增加样品比重,容易加样。
600V电压进行电泳,一定时间后(约2-3小时),剥胶,用荧光TLC板在紫外灯下检测带型,在主带之下没有杂带,说明纯度是好的。
如果条件许可,也可以用银染方式染色。
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使用加有7M尿素的16%的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳。
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加入尿素的目的一是变性,二是增加样品比重,容易加样。
600V电压进行电泳,一定时间后(约2-3小时),剥胶,用荧光TLC板在紫外灯下检测带型,在主带之下没有杂带,说明纯度是好的。
如果条件许可,也可以用银染方式染色。