已经溶解的引物的问题
已经溶解的引物,为什么原先使用正常,而过一段时间再使用就不好了?
如果您溶解引物的水pH过低或污染了菌或核酸酶,会使引物降解。
使用时没有充分解冻混合,液体不均匀也可能会造成引物加入量不准确。
建议分装引物,避免反复冻溶。建议使用10mM Tris pH7.5缓冲液溶解引物,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),引物在这种条件下不稳定。还有一种可能性是引物没有问题,而是PCR使用材料特别是模板的质量与先前使用的不完全一致。
推荐
已经溶解的引物,为什么原先使用正常,而过一段时间再使用就不好了?
如果您溶解引物的水pH过低或污染了菌或核酸酶,会使引物降解。
使用时没有充分解冻混合,液体不均匀也可能会造成引物加入量不准确。
建议分装引物,避免反复冻溶。建议使用10mM Tris pH7.5缓冲液溶解引物,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),引物在这种条件下不稳定。还有一种可能性是引物没有问题,而是PCR使用材料特别是模板的质量与先前使用的不完全一致。