如何计算引物的Tm值?
引物设计软件都可以给出Tm,与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。
长度为25base以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (GC%) – 600/size*
*公式中,Size =引物长度。
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引物设计软件都可以给出Tm,与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。
长度为25base以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (GC%) – 600/size*
*公式中,Size =引物长度。