杀线虫剂的毒力测定方法有哪些
植物线虫病害在世界范围内广为为害，并严重威胁农业生产。目前防治线虫病害的农药品种少、毒性高、用量大，且主要依赖进口，因此，测定创制化合物的杀线虫活性是发现优秀杀线虫剂的关键。现在的一般筛选方法是用活体筛选。一般步骤是：
（一）供试线虫的选择
供试植物线虫需满足易培养，繁殖量大，生活史短。其中，根结线虫属的线虫较为符合要求。
（二）线虫的纯培养
以根结线虫为例，首先须对线虫的寄主植物如番茄进行无菌土栽培，使用无土栽培或灭菌土浇灌无菌苗，然后在田间选取有根结的病株，轻轻洗根至无泥土，用线虫挑针挑取单卵块，置0.1%的琼蜡三甲溴化铵（cetavlon）溶液中，将卵消毒，用无菌水漂洗，再浸在0.5%的双对氯苯基双胍基己烷双醋酸盐（hibitanediacetate）溶液中消毒，再用蒸馏水漂洗干净。放在孵化器中进行培养，每24h用毛笔蘸取卵块，用贝曼漏斗法（baermannfunnel）或离心漂浮分离法（centrifugalfloatation）于25℃孵化，收集根结线虫的2龄幼虫。
（三）供试药剂活性测定
1．离体筛选
（1）触杀法：大致步骤如下：供试线虫放入已配制好的药液中，经24h或48h处理后，在显微镜下检查线虫死活和被击倒的情况，计算毒力。
线虫死活鉴别一般采用体态法及染色法。体态法的判断标准是死的虫体多呈僵直状态，而活的体态是几度弯曲，一般盘卷和蠕动。但这种方法对呈休眠态和体形膨大的雌虫以及卵不适用，且不能绝对肯定线虫的不动就等于死亡，而弯曲的线虫等于生存。染色法是用曙红等染料对供试药剂处理过的线虫进行染色，活线虫不会被染色，死线虫会被染料染上颜色，根据线虫是否被染色，很容易判断线虫的死亡与否。用此方法对水稻潜根线虫（Hirschmanniellaspp.）、松材线虫（Bursaphelenchusxylophilus）等线虫效果都比较好。
（2）熏蒸法：该方法是测定供试药剂是否具有熏蒸作用。其方法与杀虫剂药物筛选类似，即将供试化合物和线虫放入封口的容器内，处理24h或48h，观察线虫死活情况。
2．盆栽试验
（1）土壤淋浴法：这是一种兼触杀和内吸活性测定的方法。基本程序是受试植物种植在小钵内，待幼苗长至3～5cm高，用配制好的药液淋土，第2d接种2龄幼虫，每小钵约500头。待空白对照根部感病症状明显（约20d）后进行调查。目测感病程度或设计“病情指数”进行计算，确定药效。
（2）叶面喷雾法：此方法是一种测定药物是否具叶面内吸性及是否具有向下输导特性的方法。基本程序于土壤淋浴法相似，只是施药时控制范围只限制在叶面。
另外，由于许多杀线虫剂的作用机理与结构类似的杀虫剂相同，如有机磷类和氨基甲酸酯类杀线虫剂的作用机理是抑制线虫体内的乙酰胆碱酯酶（AChE），因而对供试化合物采用酶抑制法，测试杀线虫活性有一定的理论依据。
