离子交换层析法浓缩蛋白实验
实验方法原理 | 离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。 |
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实验材料 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 准备离子交换树脂,装配层析柱,或采用批量层析。1 ml 树脂可浓缩 20 mg 蛋白质; 2. 用 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),20 mmol/L NaCl 溶液平衡树脂; 3. 加入样品; 4. 使两倍于树脂体积的 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),20 mmol/L NaCl 溶液流过树脂; 5. 用 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),1 mol/L NaCl 溶液洗脱蛋白质。 展开 |
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