泼尼松的测定—高效液相色谱法介绍
方法名称
泼尼松的测定—高效液相色谱法
应用范围
该方法采用高效液相色谱法测定泼尼松的含量。
该方法适用泼尼松。
方法原理
供试品和内标均制成甲醇溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测泼尼松（C21H26O5）和内标乙酰苯胺的吸收值，计算出其含量。
试剂
1、甲醇
2、水
3、四氢呋喃
4、稀甲醇（1→2）
仪器设备
1、仪器
（1）高效液相色谱仪
（2）色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按泼尼松峰计算应不低于3000。
（3）紫外吸收检测器
2、色谱条件
（1）流动相：水四氢呋喃+甲醇= 688 250 62
（2）检测波长：254nm
（3）柱温：室温
试样制备
1、称取供试品
取该品适量，精密称定。
2、对照品溶液的制备
精密称取泼尼松对照品适量，加甲醇溶解并稀释成溶液。
3、内标溶液的制备
取乙酰苯胺适量，加稀甲醇制成每1mL中约含有0.11mg的溶液，即得。
4、供试品溶液的制备
上述供试品加稀甲醇溶解并定量稀释成每1mL中约含0.2mg的溶液，即得供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤
分别精密吸取上述供试品溶液与内标溶液5mL，置50mL量瓶中，用稀甲醇稀释至刻度，混合均匀，取10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定炔诺孕酮和内标醋酸甲地孕酮的吸收值，按内标法以峰面积计算，即得。另取泼尼松对照品溶液，同法测定。
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