注射用环磷腺苷的鉴别检查方法
鉴别
(1)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后,加碘化钾试液0.4ml,稀硫酸2.5ml与淀粉指示液4滴,立即显紫色(2)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后,加盐酸羟胺试液0.5ml与氢氧化钠试液0.25ml,置水浴中微沸,放冷后,加盐酸2滴和三氯化铁试液1滴,立即显深紫红色(3)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品适量,加二氯甲烷溶解并稀释制成每1ml中约含3mg的溶液。对照品溶液取青蒿素对照品适量,加二氯甲烷溶解并稀释制成每1ml中约含3mg的溶液。色谱条件采用硅胶G薄层板,以石油醚(60~90℃)-乙醚(1:1)为展开剂。测定法吸取上述两种溶液各5l,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,喷以茴香醛甲醇溶液(取冰醋酸10ml与浓硫酸5ml,缓缓加到55ml甲醇中,放冷,将此溶液加人含有0.5ml茴香醛的30m1甲醇中,摇匀,避光保存),在110℃加热3~5分钟使显色。结果判断供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液的主斑点一致(4)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致(5)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集图)一致以上(3)或(4)可选做一项。
检查
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含青蒿素10mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中用流动相稀释至刻度,摇匀。灵敏度溶液精密量取对照溶液1ml,置20m量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Phenomenex luna o18柱,4,6mm×150mm,5m或效能相当的色谱柱);以乙腈-水(50:50)为流动相;检测波长为210nm;进样体积20l。系统适用性要求青嵩素峰与杂质Ⅰ峰(相对保留时间约为0.80)之间的分离度应大于4.0。灵敏度溶液色谱图中,主成分峰高的信噪比应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的1.5倍限度供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,杂质I(相对保留时间约为0.80)校正后的峰面积(校正因子为0.027)不得大于对照溶液主峰面积的0.15倍(0.15%),相对保留时间约为0.10处的杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的倍(2.0%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.3倍(0.3%),各杂质峰面积的和(杂质Ⅰ按校正后的峰面积计算)不得大于对照溶液主峰面积的25倍(2.5%),小于灵敏度溶液主峰面积的色谱峰忽略不计干燥失重取本品,在80℃干燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。炽灼残渣不得过0.1%(通则0841)。
