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血清的透析

2020.8.17

实验材料 血清HBSS


仪器、耗材 瓶子盖子无菌过滤器透析袋大烧杯本生灯三脚架量筒


实验步骤


1. 将30 mm × 500 mm 的五个透析袋煮沸,换三次蒸馏水。


2. 将透析袋转移到 Hanks’s 的平衡盐溶液中(HBSS)(HBSS 储存于4°C),冷却。


3. 在每个透析袋的一端打两个结。


4. 每个透析袋装一半的血清(需要透析的血清)(20 ml )。


5. 压入空气后将透析袋的另一端也打上结,在血清和结之间留出大约一半管子的空间。


6. 将透析袋放入 5 L 的HBSS 中,放到磁力搅拌器上搅拌,4°C 过夜。


7. 更换 HBSS,重复步骤6 两次。


8. 将血清收集到量筒中,并记录收集的量(如果少于开始时血清的量 , 则加人 HBSS 使其恢复到开始的量 。如果多于开始时血清的量,则随后加入培养基时要留出预留量 )。


9. 用一系列过滤器(无菌过滤器,0.1 μm 孔径;预过滤器:孔径大小为 5.0 μm 的玻璃纤维,1.2 μm、0.45 μm 和0.22 μm 的滤膜(如 Durapore,Millipore))对血清进行灭菌。


10. 将血清装瓶冷冻。


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