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岩藻糖苷酶的测定方法

2022.5.10

荧光法:利用AFU水解4-甲基伞型酮α-L-岩藻吡喃糖苷,释放4-甲基伞型酮,用碱性缓冲液终止反应,并使产物呈现荧光,用360nm或365nm激发波长和400nm或448nm发射波长检测荧光强度,对照不同浓度4-甲基伞型酮制备的标准曲线求酶活性。此法敏感性高,最小检出限为0.06U/L。 [1] 

比色法:以4-硝基苯α-L-岩藻吡喃糖苷为底物经AFU水解释放4-硝基苯酚,同样用碱性缓冲液终止反应,使4-NP呈显著黄色,在规定波长下读取吸光度A。用纯4-NP作标准,利用标准曲线或4-NP摩尔吸光度计算出AFU活性。本法简便,设备要求不高,国内外广泛采用。


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