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诱导干细胞的分化的方法有哪些

2023.1.12

自1981年英国的Evans等从小鼠囊胚的内细胞团(Inner
cell
mass,ICM)分离建立胚胎干细胞(Embryonic
stem
cells,ES细胞)以来,ES细胞的研究就一直是各国研究的热点。近两年,ES细胞分化诱导以及调控方面的研究取得了很多重要的进展,已从ES细胞诱导出神经细胞、心肌细胞、血管和内皮细胞等。利用ES细胞的定向分化可望在基因研究、细胞治疗和组织器官替代治疗等的研究中发挥重要作用。
1.常用的体外诱导方法是在体外培养的成体干细胞中加人入诱导因子。诱导因子包括各种能影响细胞分化的物质,如血清、糖分、维生素、以及各种蛋白因子等。
2.日本学者Oh等首先报道,高浓度肝细胞生长因子(HGF)体外诱导大鼠骨髓细胞分化为肝细胞,并表达CK8,
CK18,
ALB等。
3.2002年,Schwartz等将大鼠、小鼠和人的多能成体前体细胞(MAPC)接种到铺有基质明胶或纤维连结素的培养瓶中,用60%DMEM(低糖型)+
2%
FCS培养体系培养,并加入HGF和/或成纤维细胞生长因子-4(FGF-4),在培养的第7天,MAPC分化为表达肝细胞核因子-3BETA,GATA-4
,CK-19和AFP的上皮样细胞,在第14-28天,这些上皮样细胞表达CK-18,
HNF-4和HNF-1
alfa。大约在第21天,CK-18和ALB染色阳性。这些上皮样细胞也具有肝细胞功能特征:分泌尿素和白蛋白,能摄取低密度脂蛋白并贮存糖原。
4.结果表明,用HGF和FGF-4在体外能将MAPC诱导分化成具有形态、表型和功能特征的肝细胞。实验表明,FGF-4单用可诱导肝细胞分化,用HGF处理的细胞分化程度更高。

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