徕卡LMD在研究冠状病毒对细胞NF-κB信号通路和染色质...-1
徕卡LMD在研究冠状病毒对细胞NF-κB信号通路和染色质分布的使用
冠状病毒因为包膜上密布着类似日冕的棘突而得名，属于冠状病毒科，正冠状病毒亚科的冠状病毒属。根据血清学和基因组学特点，该属名代表了α、β、γ和δ四个属。目前已知感染人的冠状病毒包括7种，即α属的普通冠状病毒HCoV‑229E和HCoV‑OC43，β属的HCoV‑NL63、HCoV‑HKU1、严重急性呼吸综合征（SARS）-CoV和中东呼吸综合征（MERS）-CoV，以及此次导致武汉不明原因肺炎的新型冠状病毒（2019-nCoV）。其中，HCoV‑HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV和2019-nCoV可以导致人类肺炎，其他是成人普通感冒的病原，儿童较敏感，可致上呼吸道感染。
早在2008年的《Cell》中，一组来自日本科学家发表了一篇题为《Visualizing spatiotemporal dynamics of
multicellular cell-cycle
progression》的文章，文中表示：他们得到了两种新型荧光蛋白，其中一种能使得G1期细胞核呈现红色，而另一种使得S/G2/M期细胞核呈现出绿色，研究人员将这些蛋白称为荧光泛素化细胞周期标志物（Fucci）。
图1 Cell封面图片：处于不同细胞周期的细胞核发出红色或绿色荧光
图2 LMD-切割细胞的典型周期状态
利用这一发现，来自德国吉森大学药理学的Poppe与他的合作者们研究了冠状病毒对细胞NF-κB通路和染色质分布的影响。
研究人员首先用HCoV-229E感染A549肺癌细胞模型，然后通过激光显微切割（LMD6000）结合免疫荧光用于分解（i）被HCoV-229E感染的细胞，（ii）与感染细胞紧邻的细胞，（iii）距离感染细胞至少150μm的细胞（“远端细胞”）和（iv）单独的未感染的细胞。
图3 细胞株示意图
