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类风湿因子的实验室检测

2022.6.27

  RF的检测最初采用致敏绵羊红细胞凝集试验(Rose -waaler法)进行检测,最常采用lgG吸附的胶乳颗粒凝集试验;但此法的灵敏度和特异性均不高,而且只能检出血清中的lgM类RF。lgG类和lgA类RF则需要用RIA或ELSA等方法检测。

  1.胶乳凝集试验 RF是一种主要发生于类风湿关节炎患者体内的抗人变性IgG抗体,可与lgG的Fc段结合。将变性lgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上,此致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时,即可发生肉眼可见的凝集,称胶乳凝集试验。其原理为将变性lgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上。

  2.ELISA法 在用热凝集变形IgG包被聚苯乙烯反应液体的微孔中,加入待测血清,如有RF存在,则相互结合,随后再加入酶标记热凝集变性的lgG与之反应,在加入底物后即可显色。根据显色程度可判断有无RF存在及其水平,此为双抗原夹心ELSA法。

  3.免疫比浊法 免疫散射比浊法检测类风湿因子的原理是当包被有人IgG球蛋白/绵羊抗人IgG球蛋白的含有类风湿因子的标本与抗原抗体复合物的聚苯乙烯颗粒进行混合后,立即会发生颗粒凝集现象。检测样品光线随着悬浊液浓度发生了散射的改变,在仪器中显示的散射光强度样本中类风湿因子的含量,从而,把检测结果与已知浓度的标准品进行对比分析,这样可以把某个样本中类风湿因子的含量确定下来。比浊法是近年来开始使用的一种RF测定方法,其操作自动化强、重复性好,对一些规模大、标本检测量多的单位来说,应用自动化分析仪进行测定RF有测定速度快、结果准确、重复性好等优点,因而在国内得到了较多的应用。

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