TIGIT人源化小鼠模型助力肿瘤免疫治疗新进程
TIGIT是T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白，它在淋巴细胞中表达，表达最高的是效应和调节性CD4+ T细胞、滤泡辅助CD4+ T细胞、效应CD8+ T细胞和自然杀伤（NK）细胞。CD155（PVR）是TIGIT的高亲和力受体，也有实验表明CD112和CD113也与TIGIT结合，但亲和力较弱。CD155和CD112同时也是CD226的配体，CD226是启动NK细胞杀伤肿瘤细胞的主要活化性受体之一。CD226与TIGIT竞争，刺激T细胞活性。而肿瘤表面高表达的CD155一旦与NK或T细胞表面的TIGIT结合，它们对肿瘤细胞的杀伤作用就会被抑制。临床前研究显示，抑制TIGIT可能促进T细胞的增殖和功能[1]。
TIGIT在肿瘤免疫周期的多个步骤中起抑制作用，如下图所示：
①TIGIT可以抑制NK细胞效应功能，从而使肿瘤细胞逃避杀伤并且阻止癌细胞抗原的释放。
②T细胞表达TIGIT可以抑制树突细胞共刺激能力，导致癌症抗原呈递减少，但抗炎细胞因子如IL-10增加，TIGIT还可以在其他细胞如肿瘤细胞上诱导CD155信号传导。
③TIGIT+ Tregs或CD155刺激的骨髓细胞可以抑制CD8+ T细胞效应功能或向CD4 + T细胞极化。
④TIGIT可以直接抑制CD8+ T细胞效应功能，或TIGIT+ Tregs可以抑制CD8 + T细胞效应功能并阻止癌细胞的清除[2]。
据相关研究表明，在癌症模型中，大量的细胞毒T细胞和辅助T细胞表达PD-1或CTLA-4，意味着这些T细胞处于耗竭状态，但研究发现只有一小部分NK细胞表面有PD-1或CTLA-4。肿瘤内的大部分NK细胞表达TIGIT，它们产细胞因子能力显著下降，出现凋亡。这说明采用PD-1抗体或CTLA-4抗体治疗癌症，有可能不能恢复大多数NK细胞的战斗力。后来的动物模型研究发现，即使是没有T细胞，TIGIT抗体仍旧可以逆转NK细胞的耗竭，延缓肿瘤的生长速度，缩小肿瘤的体积。由于NK细胞识别癌细胞是不依赖于肿瘤抗原的，所以恢复NK细胞的战斗力很关键，而且有助于重新活化细胞毒T细胞[3]。
TIGIT在NK细胞中构成了一个以前未被重视的检查点，单独或联合其他检查点受体靶向TIGIT是一种很有前途的抗癌治疗策略。
目前尚无TIGIT靶点相关上市药物，其相关药物在肿瘤治疗领域中的研究情况如下图所示：
TIGIT人源化小鼠模型，是评估人TIGIT抗体药物体内药效的有效工具。
品系信息
基因编辑策略
蛋白表达分析
采用流式细胞仪对野生型(WT) C57BL/6和纯合子B-hTIGIT小鼠脾细胞进行检测分析。实验结果显示WT小鼠检测到mTIGIT+细胞，纯合B-hTIGIT小鼠检测到hTIGIT+细胞，说明TIGIT人源化小鼠模型建立成功。
体内药效验证数据
用B-hTIGIT小鼠进行TIGIT Ab功效评估实验
将小鼠结肠癌MC38细胞皮下植入纯合B-hTIGIT小鼠中。当肿瘤体积为约150±50mm3时，将小鼠分成对照组和治疗组（n = 7）。实验数据结果表明抗人TIGIT抗体抑制纯合B-hTIGIT小鼠中的肿瘤生长，说明B-hTIGIT小鼠模型是体内hTIGIT抗体功效研究的有效工具。（A）肿瘤平均体积±SEM，（B）小鼠平均体重±SEM。
人TIGIT抗体(Tiragolumab Analog)与人PD-1抗体联用药效实验
将小鼠结肠癌MC38细胞移植到B-hPD-1/hTIGIT纯合小鼠体内建立皮下肿瘤模型，待肿瘤体积约150±50mm3时将动物入组至对照组和治疗组(n=6)。结果显示：抗人PD-1抗体与抗人TIGIT抗体联用对肿瘤生长有明显的抑制作用。A. 肿瘤平均体积±SEM，B. 小鼠平均体重±SEM。
参考文献：
[1] Yu X, Harden K, Gonzalez LC, et al. The surface protein TIGIT suppresses T cell activation by promoting the generationof mature immunoregulatory dendritic cells. Nat Immunol. 2009 Jan;10(1):48-57.doi:10.1038/ni.1674
[2] Manieri NA, Chiang EY, Grogan JL. TIGIT: A Key Inhibitor of the Cancer Immunity Cycle. Trends Immunol. 2017 Jan;38(1):20-28. doi: 10.1016/j.it.2016.10.002.
[3] Qing Z , Jiacheng B , Xiaodong Z , et al. Blockade of the checkpoint receptor TIGIT prevents NK cell exhaustion and elicits potent anti-tumor immunity[J]. Nature Immunology, 2018.Jun 18. doi: org/10.1038/s41590-018-0132-0.
-
项目成果
-
科技前沿
