关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题-1
因为自己做PC12细胞培养，想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被，到论坛里搜索了下，关于多聚赖氨酸的帖子不少，看了一些帖子，将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题，这些帖子里面都解释了。
注：我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位朋友。
一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水，或者PBS，浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。
二、其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例)：
三、我配成1mg/ml的储存液，用Mini-Q(超纯水)配制，放在－20℃储存，使用时稀释10倍（也用超纯水），即终浓度100ug/ml，过滤后使用。工作液过滤使用，如一次用不完，放在4℃储存。
多聚赖氨酸在水溶液中易分解，所以一次不要配太多工作液。
四、我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用 PBS配,但没写PH,浓度，向各位请教。
答：PH应该在7.0~7.4，PBS：取氯化钠7.650 g，无水磷酸 氢二钠0.724 g，磷酸二氢钾0.210g 溶于蒸馏水1000 mL 中，以1N 氢氧化钠 溶液调pH 值为7.0~7.4，经121℃灭菌15 分钟
五、我准备用多聚赖氨酸涂片培养细胞,不知道多聚赖氨酸涂过的玻片如何灭菌？能否干烤灭菌？
答：Sigma的产品说明书上写的很明白的。
另外，有本书上是这么写的，供参考：
Poly-lysine-coated tissue culture surfaces
To coat coverslips: Prepare a stock solution by dissolving 25 mg/ml
polylysine in 4.73 ml water (both poly-L-lysine and poly-D-lysine are
used to coat tissue culture surfaces; check specific protocol for choice
of isomer) and filter sterilize through a 0.22-μm filter. Store in
100-μl aliquots at ?20°C. When ready to use, dilute one aliquot in 40 ml
water to prepare 13 μg/ml working solution. Sterilize coverslips by
autoclaving prior to coating. Dip coverslips in the working solution,
then incubate 15 min to several hours in a humidified 37°C, 5% CO2
incubator. Allow surface to dry.
To coat culture dishes or 8-well chamber slides: Prepare a stock
solution by dissolving 100 mg poly-lysine in 100 ml water (both
poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue culture
surfaces; check specific protocol for choice of isomer) and filter
sterilize through a 0.22-μm filter. Store in 5-ml aliquots at ?20°C.
When ready to use, dilute 1 part stock solution with 9 parts water to
prepare 100 μg/ml working solution. Fill tissue culture dishes or slide
wells with the working solution and incubate 1 hr in a humidified 37°C,
5% CO2 incubator, then remove solution by vacuum aspiration and allow
surface to dry.
Store coated tissue culture ware up to 3 months at 4°C. Use diluted
solutions only once, but unused diluted aliquots can be stored up to 3
months at 4°C.
你可以配置好PLL后单独将其过滤除菌，分装，待用。玻片也是事先泡洗洁精，泡酸，双蒸水洗，烘干后高压灭菌，待用。培养的前一天包被培养板时先把玻片放入培养孔然后把PLL加到玻片上，静置15分钟，洗出多余的PLL，然后用高压过的双蒸水洗板，培养板放入37度烘箱里过夜就可以用了。
六、多聚赖氨酸消毒该怎么办？？
答：紫外照射消毒我没试过，但用0.22um的滤器消毒是没问题的（小的一次性滤器可以过滤200ml)。在液体消毒时，如果所含成份经过高温，钴 60照射发生变性者，建议用滤器（0.22），多聚赖氨酸为氨基酸类，建议用滤器，如果要求程度高，可以两个滤器过滤两次。
七、资料：多聚赖氨酸溶液（Poly-L-Lysine Solution）Conc.: 0.1% w/v, in water Storage:
18-26℃Thimerosal, 0.01%, added as preservative
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。
