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降落PCR(Touchdown PCR)技术的的优点

2021.12.29

综合比较普通PCR技术和最大耐受量聚合酶链反应,认为前者程序简单,省时,一般的PCR扩增仪都可完成,但缺点是退火温度不适当时容易出现假阳性;而最大耐受量聚合酶链反应虽然程序复杂,需要扩增仪有较大的内存,但能非常有效地降低或避免假阳性,且不在理想的工作条件(比如最佳镁离子浓度)下也可扩增出产物。

 这就是降落PCR技术的优点吧。不过我认为。如果能用普通PCR技术扩出来的话,尽量用普通的聚合酶链反应,虽然降落聚合酶链反应比较省事省力,但是,它在一个很宽的退火温度里扩增,乱七八糟的条带肯定比较多哈。虽然,电泳可能看不到。 

降落PCR的一个优点是可以增加某些基因的特异性,不仅我自己在扩基因的艰难历程中,发现了这一优点,而且也推荐给周围的人,如果常规PCR循环程序的基因扩增效果不佳,我就来热启动加降落PCR.在非特异性背景较高的情况下,这招的确有效,但不绝对。


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