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巢氏PCR(Nested PCR)技术的定义和特点

2022.10.18

1.定义:也称套式PCR是指利用两套PCR引物(巢式引物)进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。在这种技术中,首先用一对外引物进行第1轮PCR,然后再使用第1对引物扩增的DNA 序列内部的一对引物再次扩增。

2.优点:由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。在一定情况下,这种方法对减少PCR后扩增产物的污染问题极为有用,但它增加了每次试验的复杂性。

3.应用范围:一般应用于动物方面。如:病毒,梅毒螺旋体,HIV,肿瘤基因等。


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