蛋白质生产高峰期的确定实验
基本方案
实验材料 | 蛋白质 |
---|---|
试剂、试剂盒 | 胎牛血清 |
仪器、耗材 | 培养瓶 离心机 |
实验步骤 |
1. 分别接种3×106 Sf9细胞于15个盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培养液60 mm血组织培养皿中。27℃溫育2 h,使细胞贴壁,然后每次均以感染复数(MOI)为10的量,用野生型病毒感染7个培养皿,用重组病毒感染7个培养皿,剩余的一个培养皿为非感染对照。
2. 在感染后的不同时间(从感染后约15~72 h)收获细胞,感染后15 h 收获非感染细胞。将细胞和培养物上清转移至离心管,4℃1 000 g 离心10 min,收获细胞。
3. 处理并分析细胞和上清(分泌型重组蛋白)。
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