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lowry法测蛋白质原理

2023.3.24

lowry法测蛋白质原理如下:

实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应。

Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤,以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应,蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物。

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Folin酚试剂在Cu+的催化下,磷钼酸-磷钨酸盐被蛋白质中的芳香族氨基酸残基还原,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物,其最大吸收峰在745~750nm处。在一定的浓度范围内,所形成蓝色的深浅与蛋白质含量之间有线性关系,可用于蛋白质含量的测定。

在蛋白质混合物经过粗分离、纯化后,可以得到目的蛋白。蛋白分离公司提供的蛋白的粗分离服务首先是使用蛋白质提取缓冲液提实验材料,由于蛋白提取中目标蛋白质的浓度往往较低,需要采取一些简单的方法使目标蛋白浓缩,同时去除大量的杂质。

然后根据蛋白质分子大小、分子性状、分子表面特征或分子带电状况进行进一步纯化,也就是蛋白质的细分级。在蛋白分离纯化后,使用Lowry法测重组蛋白的含量。美迪西提供蛋白分离服务,可以根据客户要求,承接从mg到kg级的化合物纯化分离服务。


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