植物细胞核的移植的步骤
在植物中,原生质体与核的融合以烟草、矮牵牛的核移植为例,其步骤是:
①先使矮牵牛游离核与烟草原生质体各自悬浮并沉淀在0.25M硝酸钙溶液中,pH6;
②去掉上清液,再把它们悬浮起来,以适当比例使核与原生质体在试管中混合、离心,随后加入45%聚乙二醇溶液1毫升使之聚合:
③30分钟后,徐徐加入4毫升0.2M硝酸钙(被pH9的甘氨酸氢氧化钠所缓冲)以诱导融合摄取核;
④15分钟后加0.2M硝酸钙(pH6);
⑤再过20分钟,原生质体用培养液冲洗;
⑥镜检后,将具有双核的(其中一个是矮牵牛的核)烟草原生质体进行培养。
推荐