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微流控芯片在蛋白质分析中的应用

2020.4.27

  1、酶学分析

  在硅片、玻璃芯片、石英芯片或者高分子聚合物芯片上构筑简单的十字通道或者反映舱,加上电化学检测器、光学检测器或者其他的检测系统就可以完成简单的酶的测定。如,Hadd-AG在芯片上制作了具有5个溶液出入通道的酶检测系统,首先将荧光基团底物RBG与Tris缓冲液混合,在与B半乳糖苷酶溶液和竞争性抑制剂PETG溶液混合,反应后底物酶解产物产生荧光物质通过激光诱导荧光检测器检测。该系统所用的酶和底物仅为120pg和7.5ng,比常规分析方法减少4个数量级,显示了微流控分析芯片酶法分析在药物研制临床诊断等领域的良好运用前景。

  2、免疫分析

  免疫分析是最重要的分析方法之一,常规的免疫分析需要比较长的分析时间,液体处理过程也比较麻烦,而且需要比较多的昂贵的抗体试剂。微流控分析芯片可以有效的克服这一缺点,在芯片上整合分析系统可以加强反应效率,简化分析过程、减少分析时间、降低试剂的消耗。如Sato等用抗CEA抗体预先包被聚苯乙烯珠并导入到通道中,在通道中构筑了一道围堰来挡住这些微珠,然后与含有CEA的血清样本、一抗、胶体金标记的二抗进行反应,通过3种抗体进行的夹心法免疫分析可以超痕量的检测血清分钟的CEA,整个分析时间减少到35min左右。

  3、蛋白质组学研究

  蛋白质柱分析被认为是继基因组分析后最具有潜力的领域。随着技术的发展,蛋白质组研究已经从基于凝胶电泳分离向着与质谱联用的方向发展。由于蛋白质组研究需要大规模、高通量的蛋白分析和鉴定方法,因此耗样量低、高通量的微流控芯片分析技术与高灵敏的质谱检测技术联用具有很大优势。如,Gao在芯片上集成了蛋白质分解、多肽分离和质谱鉴别集成装置,该装置使原来数J时完成的工作在5min内完成,试剂用量在纳克或者纳克以下。


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