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肺炎支原体及其实验室检测方法概述

2021.5.15

一、肺炎支原体简介

早在1938年,Reimann报道了七名罹患肺炎的患者,其临床表现不同于一般的细菌性肺炎,但却有着类似的临床表现与病程,于是将这种不明原因的肺炎称之为原发性非典型肺炎,并沿用至今。1944年,Eaton等从一名患原发性非典型肺炎患者的痰液中分离出一种病原体,可引起棉鼠和地鼠肺炎,因其能通过滤菌器而疑为病毒,称为Eaton因子。此后大量志愿者试验和实验室研究均表明Eaton因子是人类呼吸道病原体,但直到20世纪60年代初,Marmion及Goodburn根据Eaton因子对抗生素的敏感性提出Eaton因子不是病毒。1962年,Chanock和Hayflick应用无细胞人工培养基成功分离培养Eaton因子,并提议将其命名为肺炎支原体(Mycoplasma.pn-eumoniae,Mp)。

Mp是社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)的主要病原体,由它引起的肺炎称为肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumoniae)。Mp存在于病人的鼻腔、 口腔和气管粘膜, 人与人之间经飞沫或气溶胶传播, 潜伏期一般为 1-3周,发病以儿童居多, 主要表现为上呼吸道感染、 气管支气管炎以及非典型肺炎,重者可引起死亡。

肺炎支原体肺炎的治疗方法与病毒性和细菌性肺炎有很大不同,因此,及时准确的诊断尤为重要;但仅凭临床表现很难与病毒性和细菌性下呼吸道感染相区别,需结合临床表现和实验室检测才可准确诊断。

二、肺炎支原体常用实验室检测方法

目前,肺炎支原体的实验室检测方法主要有传统的分离培养、血清学试验、PCR检测法、液体快速培养法等。

1、传统的分离培养

传统的分离培养方法是将病人的可疑样本接种于含血清及酵母浸膏的琼脂培养基。5~10天后观察有无典型的支原体菌落产生并结合特异的生理生化反应加以鉴定。

优点:准确性很高,几乎不存在假阳性

缺点:出结果时间很长,往往会延误治疗,仅用于研究,临床难以开展

2、血清学试验

血清学试验检测多采用胶金法、ELISA法测定IgM和IgG。

优点:检测速度很快,可及时出结果

缺点:假阳性、假阴性较多。对于免疫系统发育未成熟或存在免疫缺陷的儿童病例,易出现假阴性而失去临床治疗的机会。同时,支原体感染后抗体消退需要比较长的时间,有时显示抗体阳性,但病情可能已经得到控制。

3、PCR检测法

PCR检测法通过扩增Mp基因组16s rRNA区上特异的400bp DNA片段可早期诊断和鉴别肺炎支原体感染。

优点:灵敏度高,特异性强

缺点:

(1)检测价格很高,是培养法的8-10倍

(2)对检验人员要求高,操作复杂,需要昂贵的设备,基层医院难以开展

4、液体快速培养法

利用抗生素将样本中的杂菌抑制,只使肺炎支原体生长。肺炎支原体生长会利用葡萄糖产酸使PH降低指示剂变色,同时不产生沉淀,因此可以确定肺炎支原体的存在。

优点:

(1)检测时间较短。与传统培养法相比,大大缩短检测时间,1-2天即可报告结果。

(2)操作简单。只取患者的咽拭子,在培养基中洗脱标本后,直接放恒温培养箱培养即可。

(3)对设备要求非常低。仅需一台普通培养箱甚至恒温水浴锅即可。

(4)对人员技术要求很低。简单培训即可操作。

(5)准确性高。直接对目标菌进行检测,而不是检测抗体。

(6)可与药敏实验同时进行,为临床合理用药提供依据。尤其是现在出现越来越多的耐药菌株,对指导临床合理用药意义重大。

(7)患者无痛苦。仅需取患者的咽拭子培养即可,免去抽血的痛苦,尤其对于儿童患者来说是一大福音。

缺点:

(1)检测时间相对于血清学试验、PCR法仍然较长。

(2)有极少假阳性结果。虽然培养基中加有多种抗生素来抑制细菌、真菌生长。但是目前抗生素的滥用现象严重,会有极少数非目标菌生长造成假阳性。


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