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荧光测量

2018.7.11

荧光测量对许多生物学(叶绿素和类胡萝卜素)、生物医学(病变的荧光诊断)和环境监测是必要的测量手段。荧光测量通常需要高灵敏度的光谱仪(推荐使用AvaSpec-2048TEC,积分时间大于 5秒)。对于大多数荧光应用来说,产生的荧光能量只相当于激发光能量的3%左右。荧光的光子能量比激发光的光子能量要小(所以波长要长),而且一般都是散射光(在各个方向上辐射能量)。
      对于荧光测量装置来说最重要一点是避免激发光进入光谱仪,这可以通过不同方法实现(各种方法可以共同使用):
     1. 使用AvaLight-LED作为激发光源(窄带宽),激发光波长不在荧光光谱范围内。
     2. 把(干涉)带通滤光片或低通滤光片与AvaLight-DH-S氘-卤钨灯一起使用以得到高强度窄带宽的激发光。


     3. 确保激发光与荧光光路是90度垂直正交的,这样激发光就不会进入接收光纤(使用CUV-UV/VIS-FL或CUV-DA)。
     4. 利用荧光的迟豫时间把激发光和荧光分开。此时需要一个脉冲光源(脉冲激光器或AvaLight-XE脉冲氙灯)和一台AvaSpec-2048FT快触发型光谱仪(可通过软件改变延迟时间)。


荧光测量常用配置
光谱仪 AvaSpec- 2048光谱仪 (推荐-TEC型光谱仪)VA 光栅 (360-1100nm), 200µm 狭缝, DCL-UV, OSC软件 AvaSoft-Full 全功能软件光源 AvaLight-LED光源或 AvaLight-DH-S氘-卤钨灯光纤/探头 FCR-UV200/600-2-IND 1/2英寸反射探头    或 2根FC-UV400-2 光纤:UV/VIS谱段, 400 µm芯径, 2米长, SMA 接头比色皿支架 CUV-DA 或CUV-ALL 或CUV-FL-UV/VIS


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