总RNA提取实验——氯化锂提取法
| 实验方法原理 | 用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶，用氯化锂选择沉淀RNA ，其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ，具有快速简洁的长处，但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高，小RNA 片断丢失的缺陷。 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 一、组织或细胞匀浆
二、纯化
2. 取沉淀，加入原匀桨液1/2体积的氯化锂-尿素溶液，重复步骤1。
3. 沉淀用原匀浆液1/2体积的氯化锂-尿素溶液复溶后，加入等体积酚/氯仿/异戊醇在室温放置15~30分钟并不时摇动混匀，4 000 g 离心5分钟。
4. 取上层水相，加1/10倍体积的3 M 乙酸钠（pH5.2）及2倍体积的乙醇，-20℃放置1小时，5 000 g 离心。
5. 70%乙醇洗沉淀一次，真空干燥。
6. RNA 溶解液溶解沉淀，得RNA 。 |
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