新一代成像流式技术在免疫细胞吞噬、CAR-T免疫疗...（二）
CAR-T免疫疗法
新型抗肿瘤药一直都是各大药企的研发重点。目前临床使用的抗癌药物大多数为化学药，这类药物由于靶向性差导致患者常常会出现严重的不良反应以及耐药性。尽管药企投入了大量的人力物力，但是不得不承认传统化学类抗肿瘤药物的研发遇到了瓶颈。越来越多的科研人员把目光投向了免疫治疗，因此嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（CAR-T）成为科研界的“宠儿”。不幸的是肿瘤表达的大多数抗原不具备肿瘤特异性，因此大多数的CAR都以肿瘤相关性抗原作为靶点，但这往往会导致“脱靶”的可能性。同时对于相关的抗原选择也需要选择细胞表面抗原，以避免CAR-T脱靶的可能。因此寻找肿瘤特异性的细胞表面抗原成为CAR-T研究的关键。Bryan
W.
Day等人发现受体酪氨酸激酶在多形性胶质母细胞瘤（GBM）病人中EphA3过表达并且通过调节有丝分裂原激活蛋白激酶信号通路减少肿瘤细胞的分化。幸运的是，作者通过量化成像流式技术检测到EphA3为细胞膜蛋白，这一发现为后续的CAR-T研究提供了潜在的治疗靶点。
图4：由成像流式图像可以看到标记荧光的EphA3的分布区域，主要在细胞膜上，且在Integrin α6和CD133阳性的细胞中高表达。 对这些细胞进行统计学分析，证实EphA3高表达是有统计学意义的。 |
尽管传统化学类抗肿瘤药物的研发遇到了瓶颈，但是由于化学修饰相对简单方便，并且经化学修饰过的抗原抗体特异性和亲和力都会有所提高；因此，在CAR-T的研究中化学修饰依旧有着很大的应用潜力。耶鲁大学的Patrick
J. McEnaney等人设计合成了一类被称为“synthetic antibody mimics targeting prostate
cancer (SyAM-P)”的化合物，这类中等分子量（~ 7000
Da）的化合物同时具有抗体的结合与效应能力，因此可以有效的将免疫细胞和前列腺癌细胞特异性地结合在一起，从而增强免疫细胞对癌细胞的特异性识别和吞噬。这一发现于2014年12月16日发表在化学类的权威杂志JACS上，为CAR-T的研究提供了新思路。
图5：通过成像流式可区分发生吞噬的细胞，吞噬形成图（右下）显示SyAM-P可以帮助免疫细胞识别癌细胞；吞噬完成图（右上）证明免疫细胞可以吞噬癌细胞。左图量化分析显示此结果是有统计学意义。 |
综上所述，我们不难发现，单一的图像或者单一的群体统计学数据已经无法满足科研的需要。尤其是在精准医疗飞速发展的时代，科学家们要获得质量更高、更为可信的数据，为临床的诊断和治疗提供有力的支持。因此不仅需要科研工作者们将个体数据与群体数据的有机结合，还要通过“眼见为实”的图像证实所获得的统计学结果是有意义的。量化成像流式技术将流式细胞检测与荧光显微成像结合于一体，既能提供细胞群的统计数据，又可以获得单个细胞的图像，从而提供了细胞形态学、细胞结构和亚细胞信号分布的完整信息，这预示着该技术在未来科研领域中无限的应用潜力！
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综述
