如何选择符合您需求的HPLC或UHPLC色谱柱?(五)
5.ACE Excel色谱柱具有口碑卓越的可重现性。
柱子与柱子之间的可重现性受硅胶固定相载体的生成、固定相与固定相载体的键合以及色谱柱中固定相的填充的影响。
在色谱柱的制备过程中,每个阶段被控制得越好,色谱柱的可重现性和质量则越好。
ACE色谱柱在色谱柱制备过程中的每个阶段均得到了全面控制。
这些控制措施确保ACE色谱柱在柱间以及批次之间产生可靠且可预测的性能。
图13提供了典型批次验证测试的实例。
硅醇活性的细微变化是柱子与柱子之间选择性变化的主要原因之一。
ACE和ACE Excel色谱柱由于使用超纯试剂和严格的制造工艺控制(可以获得具有均一表面特性的高纯度硅胶固定相载体)而具有出色的可重现性。
将这种高纯度硅胶与先进的键合技术相结合,可以产生一系列高惰性的固定相,这些固定相几乎消除了色谱中的硅醇干扰,从而提供卓越的柱子与柱子之间的可重现性。
6.ACE色谱柱可以提供从UHPLC到HPLC再到制备型HPLC的易扩展性。
相同的质量控制,可以确保不同批次色谱柱的高重现性,也可以保证您更容易地在UHPLC和HPLC方法之间进行转换,或需要分离和纯化目标化合物时放大到制备应用上。
柱效当然会改变,但可以预料的是,谱带间距(选择性)将相同。
图14阐明了当使用相同的ACE键合相但不同粒径填充的色谱柱进行操作时,可以预见到分析物一致的谱带间距类型(选择性)。
图 14:将ACE固定相从UHPLC(2μm)扩展到HPLC(3μm和5μm)再至制备型HPLC(10μm)时,选择性得到了保留与保证。
条件
流动相:35:65 MeCN/0.1%TFA(溶于水中)
温度:22 ℃
波长:254 nm
分析物
尿嘧啶
2. 4-羟基苯甲酸
3. 乙酰水杨酸
4. 苯甲酸
5. 2-羟基苯甲酸
6. 对羟基苯甲酸乙酯
试验样品的这些色谱图在填充有相同的键合相但不同粒径的色谱柱上以相同的流动相条件运行,结果阐明分离从UHPLC扩展到HPLC再到制备型HPLC的容易程度。
当使用ACE Excel UHPLC色谱柱进行快速方法开发,且该方法必须可转移到HPLC时,易扩展性则显得特别有价值。
图 15:ACE固定相可以提供相同的选择性,无论它们是UHPLC、HPLC还是制备型HPLC色谱柱
条件
色谱柱:2.1 x 50 mm
流动相:1.4分钟内从30% B至90% B
A = 20mM甲酸铵+ 0.1%甲酸
B =乙腈+ 0.1%甲酸
梯度:在30%B时持续0.30分钟,在1.10分钟内从30至90%B,在90%B时持续0.40分钟
流速:0.5 mL/min
柱温:30ºC
检测:AB Sciex Triple Quad(TM)5500 MS,以ESI(+)模式运行
仪器:岛津Prominence UFLC系统
分析物
甲苯咪唑
2. 普罗替林
3. 阿米替林
4. 洛哌丁胺
试验样品的这些色谱图在ACE Excel C18 2μmUHPLC色谱柱、ACE C18 3μmHPLC色谱柱和ACE C185μm色谱柱上以相同的流动相条件运行,结果阐明ACE固定相的选择性一致,无论填充粒径如何。
这使得从UHPLC到HPLC或HPLC再到UHPLC的方法转移更加容易。同时也使得从分析型应用扩展到制备型应用更加容易。
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