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核酸提取离心后是吸上清液还是底部进行扩增检测

2022.1.11

看是哪一步的离心。
如果是常规的酚-氯仿法,第一步加提取液后65度水浴,离心,要留下上清弃沉淀。然后上清中加酚加氯仿抽提,都是留上层。再加异丙醇沉淀之后离心,这时DNA在沉淀里,去掉上清,用乙醇洗一下沉淀,用水重新溶解沉淀可以做PCR。这种方法纯度比较高,能做southern blot。
如果是一步法,有的非常简单地提取,不需要去除蛋白之类的杂质,那么研磨并加完提取液之后离心,直接取上清做PCR。这种DNA只能做个普通的筛选pcr。

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