生物色谱
生物色谱
在新药研究中，药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄与它和体内血浆蛋白如白蛋白、糖蛋白、脂蛋白和球蛋白的结合有着密切的关系。由于仅有游离药物才具有特异位点并与产生药理作用的受体结合，因此药物和血浆蛋白的相互作用直接影响到药物的药理活性。
生物色谱是将生物分子间相互作用原理与色谱过程相结合的色谱技术，根据具有生物功能的分子或细胞膜与中药有效成分特异性结合的原理，并以色谱的方式筛选和分析中药有效成分的一种研究方法。生物色谱法包括分子生物色谱法、生物膜色谱法和细胞生物色谱法。分子生物色谱法中常用的固定相包括血浆蛋白、酶、受体、抗体等生物大分子。分子生物色谱技术是基于生物大分子的特性及相互作用，分离纯化和测定具有活性的化合物和生化参数的新技术。目前生物色谱技术在中药活性成分研究中的大致思路为首先建立以血液中存在的运输蛋白为固定相进行活性成分筛选，然后以特异性靶点筛选具有特定活性的物质，在技术上将生物色谱与DAD、NMR、MS联用，使得活性成分筛选、分离及结构鉴定一体化，是中药作用物质基础研究的快捷方法。
整体柱作为近年来发展迅速的一种固定相形式，由于其相对于常规填充柱有着制备简单和在生物大分子分离分析上的良好性能和高柱效等优点，而得到了极大的关注。整体柱，又称连续床或连续棒。根据所制备的整体材料的不同，整体柱可被分为有机聚合物整体柱、无机硅胶整体柱和颗粒固定化型整体柱。其中有机聚合物整体柱的制备方法是将聚合单体、交联剂、致孔剂和引发剂的混合溶液加入空管柱中通过热引发或光引发聚合。反应完全后用有机溶剂除去致孔剂及其它可溶性化合物，即可得到大孔聚合物整体柱，然后通过对其进行化学改性以满足各种色谱模式的要求。根据所用单体的不同，有机聚合物整体柱可分为聚苯乙烯整体柱、聚丙烯酸酯整体柱、聚丙烯酰胺整体柱、分子印迹整体柱等。其中，聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（GMA-CO-EDMA）是应用最为广泛的聚丙烯酸酯类整体柱。由于它具有环氧活性官能团易于改性，不仅可用于制备不同性质的色谱填料，还可用于键合各种蛋白或酶，制成各种生物蛋白柱或酶反应器。而采用毛细管电色谱结合以整体柱为基质的生物色谱来研究药物和蛋白的相互作用，并将其作为药物活性的初步筛选手段，尚未报道。
