呼吸道合胞病毒感染对豚鼠咳嗽相关气道功能及...（一）
呼吸道合胞病毒感染对豚鼠咳嗽相关气道功能及其神经递质的影响
叶新民 钟南山 刘春丽 陈如冲 赵谨
【摘要】
目的
观察呼吸道合胞病毒RsV(感染)对豚鼠咳嗽相关的气道功能及神经递质的影响，探讨病毒感染后咳嗽的发病机制。方法雄性SPF级豚鼠60只。按数字随机法随机分成正常对照组、病毒感染组和哮喘组，病毒感染组按病毒感染后天数分为6、12、28和42 d四个组，每组10只。通过滴鼻方法接种RSV。Buxco肺功能仪测定咳嗽反射敏感性(CRs)及气道反应性(AR)。荧光定量PcR(Real—time PcR)方法检测辣椒素受体亚型l(VRl)的mRNA表达，免疫组织化学方法检测肺组织VRl及蛋白基因产物9．5(PGP一9．5)的蛋白表达。结果病毒感染6、12、28、42 d组豚鼠CRs[(8．oo士3．86)、(8．70士6．20)、(7．60±4．40)和(6．70±3．71)CCnt]均较正常对照组[(2．50±1．43)ccnt]升高(P值均<O．05)，并在12 d组达到最高峰(P<O．01)。感染后12 d组豚鼠AR对2个高浓度乙酰甲胆碱刺激结果为(1 069±156)％和(1 846±285)％，均高于正常对照组(P值分别<O．05和o．01)。感染后6、12和28 d组VRl的mRNA水平分别为1．57士O．43、1．61±o．47和1．68士o．56，均较正常对照组(1．OO土O．34)升高(P值均<O．05)，而以28 d组为最高。与正常对照组相比，感染后28 d组VRl蛋白表达增强(P<o．05)；而感染后12d组PGP一9．5表达增强(P<o．05)。结论CRS增高伴随一定程度的AR增高是RSV引起咳嗽的特点，感染引起VRl和PGP一9．5的时空变化可能与病毒感染性咳嗽的发病机制有关。
【关键词】呼吸道合胞病毒；咳嗽反射敏感性；气道反应性；辣椒素受体；蛋白基因产物9．5
呼吸道合胞病毒(RSV)是人类上呼吸道感染(URI)最重要的感染病原之一，尤其是儿童。RSV大约引起儿童90％的支气管炎，几乎所有婴幼儿在生后头3年都感染过RSV[1]。因此，进行RSV感染引起咳嗽的研究具有重要意义。目前认为，咳嗽反射敏感性(CRS)异常增高是机体咳嗽反应的一个十分重要的原因。O’Connell等L21的临床研究发现，URI引起的咳嗽患者CRS升高是其主要特征，并不伴气道反应性(AR)增高。但是，迄今为止，有关感染后咳嗽的真正机制知之甚少，还未见到RSV感染引起咳嗽的动物研究，病毒感染往往伴发AR升高，那么AR是否在感染后咳嗽中起关键作用呢?
辣椒素受体亚型1(vanilloid receptor-1，VRl)是瞬时受体电位通道蛋白的超家族的成员之一。有研究发现慢性咳嗽患者VRl显著高于健康者；而且，CRS与支气管黏膜的VRl表达呈高度相关；气道平滑肌VRl的表达也增强。表明VRl参与了慢性咳嗽的发病过程[3]，但病毒感染后VRl如何改变目前还缺乏研究。有研究发现，RSV感染可以引起标记呼吸道总神经纤维分布的蛋白基因产物9．5(protein gene product一9．5，PGP一9．5)的分布及表达
水平改变[4]。本研究将通过动态观察与咳嗽有关的CRS、AR、VRl和PGP一9．5蛋白的变化，探讨RSV引起咳嗽，尤其是感染后咳嗽的发病机制。
