呼吸道合胞病毒感染对豚鼠咳嗽相关气道功能及...（三）
2．3
Real—time PCR方法检测肺组织VRl mRNA相对表达结果表1显示RSV感染后6、12和28 d组VRlmRNA表达分别为：1．57士O．43、1．61±0．47和1．68±o．56，均高于正常对照组(P值均<O．05)，而以感染后28 d组为最高。
2．4
VRl和PGP一9．5蛋白的免疫组织化学结果见图2及表2(单位以灰度表示)。与正常对照组相比，病毒感染组豚鼠肺组织可见深黄色阳性反应物。表达强的阳性反应颗粒颜色较深，阳性反应细胞数量也显著多于正常对照组。感染后28 d组VRl表达为2．14(1．00)，较正
注：VRl：辣椒素受体亚型1；A：完全正常的免疫组化结果；B：VRl强表达；C：PGP-9．5强表达
图2 VRl和PGP一9．5蛋白的免疫组化结果DAB染色×400
常对照组[1．14(o．oo)]增强(P<0．05)。感染后12 d组PGP一9．5表达为2．29(1．00)，较正常对照组增强(P<O．05)。
3讨论
众所周知，病毒感染引起的咳嗽是急性咳嗽的最常见原因，而病毒感染后咳嗽一般为亚急性咳嗽，时间为3～8周，在亚急性咳嗽中占绝大多数，因此本实验选择了感染后6、12、28和42 d作为观察时间点。本研究发现所有感染组豚鼠的CRS均较对照组明显升高，亚急性阶段甚至还高于急性咳嗽阶段。因此，本研究的特点类似0’Connell等比研究中的临床呼吸道感染咳嗽患者，说明CRS的升高可能是病毒感染引起咳嗽的主要特点。病毒感染导致了机体的咳嗽反应增加的机制涉及到病毒引起的气道炎症，改变了控制气道的传入和传出神经，最终引起持续的咳嗽；或者是因为炎症介质引起咳嗽有关的感受器致敏。
哮喘也是咳嗽的一个常见原因，咳嗽可以作为典型哮喘的前身或作为其单独的主要症状，即我们所熟悉的咳嗽变异性哮喘(CVA)。CVA同感染后咳嗽很相似，但是它们存在2种完全不同的机制，CVA是由于气道平滑肌的痉挛引起，对支气管扩张剂敏感，而CRS正常L”⋯。而后者正如O7Connell等心1的研究发现的，则是因为CRS的升高。因为多数这些临床患者可以提供URI的病史，说明有可能是他们的咳嗽感受器在URI后变得持续敏感。因此，URI可能是通过引起辣椒素敏感的气道传入神经的敏感性增加而引起感染后咳嗽，伴或不伴气道直径或反应性的变化。
目前认为病毒感染因为破坏了气道上皮，与咳嗽密切相关的C神经纤维末梢裸露；然后刺激物引起神经末梢释放各种神经肽，不仅直接使CRS增加，并且通过活化胆碱能神经纤维释放乙酰胆碱。RSV感染引起的气道病理生理改变及相关的临床症状除了与病毒复制直接损伤相关外，更主要的是由于感染诱发了大量的细胞凶子和炎症介质释放而引起的气道免疫炎症损伤和异常修复过程。同时，病毒感染通常可以通过引起多种气道炎症因子的释放等机制，引起AR的升高。本研究中发现RSV感染导致了豚鼠CRS持续增加，同时也引起了感染组AR均有不同程度的提高。但总的说来，AR的升高与CRS的升高不平行，亚急性咳嗽阶段AR升高不明显，而后者甚至更高；哮喘组豚鼠虽然有气道痉挛，每个MeCh浓度均有明显AHR，但对辣椒素刺激的CRS并不随之增加。因此，在感染急性期的急性咳嗽中可能有气道痉挛参与，但在感染后咳嗽阶段可能关系不大，也可以说，在感染后咳嗽中AR的增高是伴发的，在其发病机制中并不起决定作用，如果给予支气管扩张剂为主的治疗可能没有太大意义。Pounsford等u叫报道支气管扩张剂能明显缓解支气管痉挛引起的哮喘患者的咳嗽反应，但对正常人的咳嗽反应没有影响；而Fujimura等凹]证明美喘清对CRS没有影响，而且吸入乙酰胆碱引起支气管痉挛但也不能增加CRS。哮喘患者吸入盐水、变应原前后的CRS差异无显著性，咳嗽阈值和气道嗜酸粒细胞性炎症、AHR均没有关联L8]。如支原体肺炎一样，尽管咳嗽症状明显，但CRS均没有明显增高‘引。
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项目成果
